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產(chǎn)品介紹：

植物血凝素(Phytohemagglutinin, PHA)是指從紅蕓豆(Phaseolus Vulgaris)中提取的一種菜豆類凝集素。它是由4個亞基通過非共價鍵結(jié)合形成的四聚體糖蛋白，包含兩種亞基分子，L亞基（白細(xì)胞凝集素）和E（紅細(xì)胞凝集素），含有5種異構(gòu)體（L4，L3E1，L2E2，L1E3 和E4）。L亞基具有白細(xì)胞凝集和高促有絲分裂活性；E亞基具有高紅細(xì)胞凝集和低促有絲分裂活性。

根據(jù)不同的亞基組成，PHA可以分為幾種不同的形式，主要包括PHA-L、PHA-E、PHA-P和PHA-M。以下是它們的在科學(xué)研究中的主要用途：

PHA-L：

主要功能：PHA-L是純化的L4四聚體，主要作為T淋巴細(xì)胞的刺激原，廣泛用于免疫學(xué)研究。它可用作INF-γICS、ELISPOT實驗的陽性對照；PBMC培養(yǎng)的刺激物；順行神經(jīng)示蹤劑等。

生物學(xué)活性：具有高促有絲分裂活性和白細(xì)胞凝集活性，但紅細(xì)胞凝集活性極低。

應(yīng)用：主要用于刺激T細(xì)胞增殖和免疫反應(yīng)研究。

PHA-E：

主要功能：PHA-E是純化的E4四聚體，主要用途是紅細(xì)胞凝集或者糖基化修飾的研究。

生物學(xué)活性：具有高紅細(xì)胞凝集活性和低促有絲分裂活性。

應(yīng)用：主要用于紅細(xì)胞凝集實驗和糖基化研究。

PHA-P：

主要功能：PHA-P是在分離和純化PHA-L和PHA-E前的PHA的蛋白質(zhì)形式，成分與PHA-M相當(dāng)。

生物學(xué)活性：具有促進有絲分裂和誘導(dǎo)干擾素分泌的活性。

應(yīng)用：主要用于刺激外周單個核細(xì)胞增殖，促進某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生和膜表面蛋白的表達。

PHA-M：

主要功能：PHA-M是植物血凝素的粘性蛋白形式，成分與PHA-P相當(dāng)。主要用于刺激外周單個核細(xì)胞增殖，促進某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生和膜表面蛋白的表達。

生物學(xué)活性：具有促進有絲分裂和誘導(dǎo)干擾素分泌的活性。

應(yīng)用：廣泛用于免疫學(xué)研究，特別是在細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生方面。

客戶應(yīng)用實例：

應(yīng)用一、使用PHA-L(abs47014909)預(yù)刺激Jurkat T細(xì)胞，探究小分子PROTAC介導(dǎo)靶向蛋白降解治療STAT3依賴性上皮癌癥的機制[1]

將HCT116細(xì)胞以1×10⁴個細(xì)胞/孔的密度接種到12孔板中進行附著，隨后用TSM-1(1μM)處理24h。然后，使用PHA(10μg/mL)和PMA(10ng/mL)預(yù)刺激Jurkat T細(xì)胞(6×10⁴)4h。HCT116細(xì)胞與活化的Jurkat T細(xì)胞共培養(yǎng)24h。ELISA試劑盒用于檢測上清液培養(yǎng)基中IL-2的水平，IL-2是監(jiān)測T細(xì)胞活化的生物標(biāo)志物。用結(jié)晶紫染色法對潛在的癌癥活細(xì)胞進行虛擬化。將細(xì)胞溶解在10%乙酸中后，使用Cytation 5酶標(biāo)儀(BioTek)在595nm下對細(xì)胞進行定量。

圖1  TSM-1在體外誘導(dǎo)T細(xì)胞活化和浸潤

應(yīng)用二：使用PHA-M(abs47014911)培養(yǎng)Jurkat T細(xì)胞，探究氟化物干擾免疫系統(tǒng)的機制[2]。

Jurkat T細(xì)胞(HTX4056，Otwo Biotech)在RPMI 1640培養(yǎng)基中生長，培養(yǎng)基補充了10%胎牛血清(FBS，abs972，Absin)、青霉素-鏈霉素溶液和5ug/mL植物血凝素-M(abs47014911，Absin)，5ug/mL Ultra LEAFTM純化的抗人CD28。細(xì)胞系在37°C， 5%CO₂和95%空氣的加濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

圖2 氟化物可以抑制T細(xì)胞活化，阻礙T細(xì)胞受體的內(nèi)化

PHA的不同形式主要區(qū)別在于它們的亞基組成和相應(yīng)的生物學(xué)功能。PHA-L和PHA-E分別具有高促有絲分裂活性和高紅細(xì)胞凝集活性，而PHA-M和PHA-P則主要用于刺激細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生。每種形式在免疫學(xué)研究和細(xì)胞生物學(xué)研究中都有其特定的應(yīng)用。

[1] Jin J, Wu Y, Zhao Z, et al. Small-molecule PROTAC mediates targeted protein degradation to treat STAT3-dependent epithelial cancer[J]. JCI Insight. 2022;7(22):e160606.

[2] Zhu S, Liu B, Fu G, et al. PKC-θ is an important driver of fluoride-induced immune imbalance of regulatory T cells/effector T cells[J]. Sci Total Environ. 2024;934:173081.

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