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距離畢業(yè)答辯還有_天,組化實(shí)驗(yàn)做不完,小愛過來想辦法

閱讀:2166      發(fā)布時(shí)間:2020-3-20
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一眨眼已經(jīng)到了三月中旬了,想必各位老師渡過了一個(gè)學(xué)生時(shí)代長(zhǎng)的寒假,假是放舒服了,可這實(shí)驗(yàn)可怎么辦呢,

怎么樣才能快速結(jié)束自己的實(shí)驗(yàn)并有一個(gè)好的結(jié)果呢,小愛不忍大家在家里著急上火,獻(xiàn)給大家小愛六字真言:

          務(wù) !


多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)實(shí)驗(yàn)原理
 

 TSA 技術(shù) (Tyramide Signal Amplification™,酪胺信號(hào)放大技術(shù)):簡(jiǎn)單來說,用該方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的 HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。

熒光素在 HRP 和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。

然后微波處理,前一輪非共價(jià)結(jié)合的抗體被洗掉,共價(jià)結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個(gè)一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,后去檢測(cè)結(jié)果。

由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng),以及一抗二抗種屬匹配問題,大大減少了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)不同種屬抗體選擇匹配的限制。

也就是說,如果用 TSA 技術(shù),同一張片子上所有的靶標(biāo)都可以選用特異性高的兔單克隆抗體。搭配同一支抗兔的 HRP 二抗就可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn),而且信號(hào)放大的倍數(shù)大大增強(qiáng)。

熒光法多重免疫組化,可同時(shí)進(jìn)行五個(gè)顏色通道以上,這種情況下發(fā)射光譜會(huì)重疊,我們可以借助多光譜成像系統(tǒng)來解決這個(gè)問題。這是傳統(tǒng)間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。而且還能真實(shí)反映關(guān)鍵蛋白的表達(dá)情況和相互之間的關(guān)系,從而極大地節(jié)約珍貴的樣品。

有困難,找小愛,輕松畢業(yè)不慌張~
 

愛必信熱賣免疫組化產(chǎn)品推薦:

實(shí)驗(yàn)步驟  推薦指數(shù)  貨號(hào)  產(chǎn)品名稱  規(guī)格  分類
樣本制備   abs9134  Formaldehyde  25ml,500ml,1L,4L  固定液
  ★★★★★  abs9179  4%多聚甲醛/通用型組織固定液  500ml  固定液
  ★★★  abs9131  Chromium(III) potassium sulfate dodecahydrate  5g,100g  處理玻片防脫片
  ★★★  abs9172  Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000)  25mg  處理玻片防脫片
  ★★★  abs9135  Gelatin  100g,500g  處理玻片防脫片
輔助試劑    abs9256  10×TBS  500ml  緩沖液
    abs952  10*TBST  100ml,1L  緩沖液
    abs961  10×PBS緩沖液  500ml,500ml*10  緩沖液
    abs962  1×PBS緩沖液  500ml,500ml*10  緩沖液
    abs9149  Triton X-100/曲拉通X-100  100ml,500ml  緩沖液
抗原修復(fù)    abs9145  Pepsin(1:3000)  50g,100g  抗原修復(fù)液
    abs9118  Proteinase K  100mg,1g  抗原修復(fù)液
  ★★★  abs9247  EDTA抗原修復(fù)液(50×)  100ml  抗原修復(fù)液
  ★★★  abs9207  冰凍切片快速抗原修復(fù)液(5×)  100ml  抗原修復(fù)液
  ★★★  abs9249  檸檬酸鈉-EDTA抗原修復(fù)液(40×)  100ml  抗原修復(fù)液
  ★★★  abs9248  檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×)  100ml  抗原修復(fù)液
  ★★★  abs9208  細(xì)胞爬片抗原修復(fù)液(1X)  100ml,500ml  抗原修復(fù)液
封閉    abs933  Goat serum  10ml,50ml  封閉血清
    abs936  Horse serum  200ml(2*100ml)  封閉血清
    abs939  Normal Monkey serum  100ml  封閉血清
    abs937  Normal mouse serum  100ml  封閉血清
    abs946  Rabbit serum  10ml,50ml  封閉血清
    abs947  Rat serum  100ml  封閉血清
    abs935  The ass/donkey serum  10ml,50ml  封閉血清
    abs9155  牛血清白蛋白(BSA)  50g,100g  封閉液
抗體孵育  ★★★★★  abs957  即用型高效免疫組化二抗試劑盒  5ml  二抗試劑盒
  ★★★★★  abs929  PAP Pen 組化筆  1支  組化筆
顯色/復(fù)染  ★★★★★  abs9210  DAB 顯色試劑盒(棕黃色,IHC)  1kit  顯色試劑
  ★★★  abs47047616  DAPI染色液  10ml,50ml  熒光染料
    abs9105  Propidium Iodide  5mg,10mg  熒光染料
    abs9140  Methyl Green, 0.1% w/v aq. soln.  100ml  熒光染料
    abs9142  Nuclear Fast Red  5g  熒光染料
  ★★★★  abs9217  蘇木素-伊紅(HE)染色試劑盒  10g,25g  熒光染料
封片    abs9177  中性樹膠(鏡檢用封片劑)  100ml  
    abs9234  抗熒光淬滅封片液  5ml  
    abs9235  抗熒光淬滅封片液(含DAPI)  5ml,25ml  
    abs9236  抗熒光淬滅封片液(含PI)  1ml  

 

愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨):
二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子、信號(hào)通路調(diào)節(jié)劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒;動(dòng)植物提取物,定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...

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