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解析腫瘤細胞培養(yǎng)易出現(xiàn)的問題

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腫瘤細胞培養(yǎng)的同學如果互相交流會發(fā)現(xiàn),不同的實驗室有些規(guī)則是不一樣的,初學者經(jīng)常不知對錯,小編今天就和大家總結(jié)一下這些糾結(jié)的問題,希望對你的細胞之路有所幫助。
細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活。
可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清品牌?
可以,但是不能頻繁更換。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。更換不同品牌的血清之初,可能細胞會有一個短暫的適應過程,適應后,好的血清會促進細胞良好生長。建議選擇合適的放心品牌血清,而不是在假貨橫行的當下選擇昂貴的血清,因為高價格*是假貨的重區(qū)。即使買到,也肯定造成了資金的浪費。Clark血清致力于打造國內(nèi)*放心品牌血清,從銷售渠道控制、革命性外包裝、反饋跟蹤體系和重獎打假四個方面入手,開國內(nèi)先河,保證每一瓶都是,讓用戶放心。
培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應添加任何抗生素。
細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?
腫瘤細胞冷凍保存時zui常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10% DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95 %原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO 稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成。  
DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?
冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650),其本身即為無菌狀況,*次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4 C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜。
Chelidonine    白屈菜堿    476-32-4    20mg
Ellagic acid    鞣花酸    476-66-4    20mg
Mangiferin    芒果苷; 芒果甙    4773-96-0    20mg
Dehydrocostus lactone    去氫木香內(nèi)酯    477-43-0    20mg
Obtusifolin    決明蒽醌; 美決明子素    477-85-0    20mg
Bergenin    巖白菜素    477-90-7    20mg
Nobiletin    川陳皮素; 蜜橘黃素; 川皮亭    478-01-3    20mg
腫瘤細胞

 

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