您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品分類品牌分類
-
樣品瓶和蓋墊 Thermo色譜柱 螺口頂空樣品瓶 經(jīng)典型HPLC分析柱 抽屜儲(chǔ)藏柜 氮吹組件配件 手動(dòng)壓蓋器 Propac系列離子色譜柱 Thermo Scientific 壓蓋器和去蓋器 Thermo premium 樣品瓶及蓋墊 National 樣品瓶?jī)?chǔ)藏柜 National 樣品瓶架 National 20ml 鉗口頂空套裝 National 樣品瓶配套蓋墊 SureStop 便攜套件 SMART Digest 蛋白抗體消化產(chǎn)品 Thermo Scientific HyperSep SPE 產(chǎn)品 Thermo Scientific SOLA SPE 小柱和96孔板 氮吹儀 氣相檢測(cè)工具 TRACE-TR 氣相柱 Trace GOLD毛細(xì)管氣相柱 Hypersil 經(jīng)典型HPLC色譜柱 Hypurity HPLC 色譜柱 Betasil HPLC 色譜柱 BioBasic HPLC 色譜柱 BioBasic SEC 色譜柱 Hypersil Green PAH HPLC色譜柱 Hypercarb HPLC Acclaim HPLC色譜柱 Syncronis HPLC 色譜柱 Hypersil GOLD HPLC 色譜柱 進(jìn)樣針 用于AGilentGC:5890,6890 用于Trace Series GC 用于TRACE 1300系列GC GC超凈筒式過濾器 BetaBasic HPLC 色譜柱 National 樣品儲(chǔ)存非預(yù)裝便攜套件 Thermo Scientific Choice 樣品瓶 National頂空蓋墊 National 頂空樣品瓶 National 樣品瓶和內(nèi)插管 AVCS便攜套件和組裝套件 樣品瓶和瓶蓋 SWAP-IT GC-MS 接口系統(tǒng) HyperREZ XP HPLC 色譜柱 ProPac/MabPac蛋白/抗體分析色譜柱 Accucore HPLC 色譜柱 MS 認(rèn)證樣品瓶 GC 附件
測(cè)定人血漿中25-OH-VD2 和 25-OH-VD3含量的檢測(cè)方法
說起補(bǔ)鈣，營(yíng)養(yǎng)專家認(rèn)為：生長(zhǎng)期、孕期、更年期、老年期要補(bǔ) ，鈣的補(bǔ)充是一種常態(tài)，而且會(huì)貫穿人一生。每個(gè)人都需要補(bǔ)鈣，但是大部分時(shí)候，我們只需通過日常飲食就可以獲取所需的鈣元素。而那些真正需要額外補(bǔ)充鈣劑的，多是處于青春期、孕期、更年期、老年期這些階段的人群。
鈣能不能吸收和維生素D是否缺乏有關(guān)
我們補(bǔ)鈣的目的是為了骨骼的健康，從口服鈣到沉積在骨骼上的幾個(gè)環(huán)節(jié)都需要維生素D參加。維生素D是骨骼健康的重要指標(biāo)，主要功能是維持人體內(nèi)鈣的代謝平衡以及骨骼形成。研究表明維生素D缺乏會(huì)引起一系列疾病，與人體免疫功能異常、心血管疾病、代謝性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤等密切相關(guān)。由于公眾增加關(guān)注維生素D缺乏對(duì)于身體健康的影響，在過去的幾年內(nèi)，樣品數(shù)量檢測(cè)大大增加。
維生素D (Vitamin D) 是類固醇的衍生物，又可分為維生素D2（麥角鈣化醇）和維生素D3（膽鈣化醇）。維生素D2體內(nèi)無法產(chǎn)生，來自于飲食攝取，多含于植物性食物中，它是由植物的麥角固醇經(jīng)陽光照射而合成的。人體皮下儲(chǔ)存有從膽固醇生成的7-脫氫膽固醇，受紫外線的照射后，可轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素D3，也可從強(qiáng)化奶或其他肉類食物中獲得。
所以臨床對(duì)25-羥維生素D的濃度監(jiān)測(cè)具有非常重要的意義，評(píng)估維生素D營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，協(xié)助對(duì)高鈣血癥、骨質(zhì)疏松癥、佝僂病、甲狀旁腺亢進(jìn)和25羥化缺陷等疾病的臨床診斷，指導(dǎo)臨床醫(yī)生對(duì)心血管疾病、自身免疫病、糖尿病和某些藥物的治療與補(bǔ)充。
多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，人體血中25-羥維生素D營(yíng)養(yǎng)判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：
目前常用的檢測(cè)25-羥維生素D含量的方法有競(jìng)爭(zhēng)性蛋白結(jié)合法（CPBA）、放射免疫法（RIA）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法（CLIA）、液相色譜法（HPLC）等。這些方法大部分耗時(shí)、步驟冗雜，無法滿足臨床簡(jiǎn)便、高通量的要求；并且血液中 維生素D濃度太低，檢測(cè)限達(dá)不到要求。
這次我們?nèi)耘f使用明星產(chǎn)品SOLA HRP對(duì)血漿樣品進(jìn)行預(yù)處理，使用Syncronis C18色譜柱保留分離VD，建立了測(cè)定人血漿中25-OH-VD2 和 25-OH-VD3含量的檢測(cè)方法。
前處理步驟：
10mg 2mL SOLA HRP 96 孔板
（PN：60309-001）
活化
500℃甲醇，500μL 含2% 甲酸的水
上樣
200μL 血漿
清洗
200μL 含水/ 甲醇(60:40)
洗脫
200μL 甲醇2 次
40℃氮?dú)獯蹈珊笥盟?
乙腈定容到100μL
LC方法：
色譜柱:
Syncronis C18 1.7μm 50×2.1 mm
（PN：97102-052130）
流動(dòng)相:
A: 水+0.1% 甲酸
B: 乙睛+0.1% 甲酸
梯度方法:
2min 內(nèi)，70-100%B
流速:0.8mL/min
柱溫:40℃
進(jìn)樣量:50μL
靈敏度：
LOQ 5ng/mL
線性范圍：
血漿中25- 羥基Vit D2 和25- 羥基Vit D3在5 -1000ng/mL 濃度范圍成線性，r2=0.9968 和0.9981
回收率結(jié)果：
血漿樣品添加25-OH Vit D2 和25-OH Vit D3 的回收率>94%，RSD<4.0%。
體內(nèi)維生素D濃度的準(zhǔn)確定量是診斷維生素D缺乏相關(guān)疾病診斷和治療反饋效果的重要指標(biāo)。采用SOLA HRP對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，Syncronis C18液相色譜柱保留，所得25-OH-VD2 和 25-OH-VD3的LOQ、標(biāo)準(zhǔn)曲線、回收率均符合臨床檢測(cè)要求，具有非常高的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性，適用于血漿基質(zhì)中維生素D臨床樣本的快速檢測(cè)。
后小編啰嗦一句，體內(nèi)維生素D的水平，決定每個(gè)人補(bǔ)充維生素D的利弊。我們不推薦沒有任何理由地普遍補(bǔ)充維生素D。