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酶標(biāo)儀的檢測(cè)單位和計(jì)算方法

閱讀:1163      發(fā)布時(shí)間:2023-1-9
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  酶標(biāo)儀是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)(EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。
  酶標(biāo)儀工作原理:使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
  酶標(biāo)儀檢測(cè)單位:
  光通過被檢測(cè)物,前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
  檢測(cè)單位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系:
  E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度,Ι為從被檢測(cè)物出來的光強(qiáng)度。
  OD值由下述公式計(jì)算:
  c為檢測(cè)物的濃度 b為檢測(cè)物的厚度 a為摩爾因子
  在酶標(biāo)儀特定波長下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測(cè)定檢測(cè)物時(shí),我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測(cè),稱為測(cè)量波長。

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