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使用全波長酶標(biāo)儀要注意以下幾個(gè)方面

閱讀:1187      發(fā)布時(shí)間:2022-1-21
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  全波長酶標(biāo)儀是電磁波,波長100nm——400nm稱為紫外光,400nm——780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。綠色植物之所以是綠色,是因?yàn)橹参镂盏拇蟛糠譃榧t橙光和藍(lán)紫光,但對綠色不吸收,反射出來,呈現(xiàn)為綠色。全波長酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液。在使用全波長酶標(biāo)儀的時(shí)候,我們應(yīng)該注意這些方面:
  一、外觀
  全波長酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號,編號,生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開關(guān)均能正常工作,外表面無明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。
  二、全波長酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性漂移、
  選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測量標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片測量操作按儀器說明進(jìn)行、,記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測量值之差不應(yīng)超過±0.00。
  三、吸光度測量的準(zhǔn)確度
  選用405,492和620nm波長,以空氣為參比,分別測量標(biāo)稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測試板代替酶標(biāo)板,按儀器說明連續(xù)測量3次,按下式計(jì)算準(zhǔn)確度:AA=1/3A、+A。+A3、—A:A:為標(biāo)準(zhǔn)值、。
  四、吸光度測量的重復(fù)性
  波長選用同3、,在酶標(biāo)板排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測量5次。記錄每次測量的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對應(yīng)孔吸光度值。
 ?。ㄎ澹┤ㄩL酶標(biāo)儀的線性
  選用540nm波長,將標(biāo)稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入測試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測量3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于測試板的同一孔位中,重復(fù)測量3次。
  六、測量速度的檢定
  選用492nm波長,放人96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測量,用秒表計(jì)測儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。
  全波長酶標(biāo)儀除了在選購時(shí),應(yīng)盡可能自檢外,在用于中也應(yīng)定期檢定,以保證全波長酶標(biāo)儀測量的有效性。

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