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光柵掃描酶標(biāo)儀雜光率低,波長準(zhǔn)確性高

閱讀:805      發(fā)布時(shí)間:2021-5-20
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光柵掃描酶標(biāo)儀又稱微孔板分光光度計(jì)、全波長讀板機(jī),以光柵為分光元件、以微孔板為樣品載具的生化識讀設(shè)備,主要用于科研領(lǐng)域。光柵掃描酶標(biāo)儀與傳統(tǒng)的濾光片型酶標(biāo)儀相比,具有如下優(yōu)勢:

一、波長選擇不受限制

光柵掃描酶標(biāo)儀的分類方法眾多,一般來說,可以分為濾光片型和光柵型兩大類。總體來說,濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),可以滿足大部分實(shí)驗(yàn)的需要,是日常檢驗(yàn)的主流。

但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長和數(shù)量限制,不可能滿足日益增加的實(shí)驗(yàn)類型的檢測需要,而且有時(shí)需要對物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進(jìn)行研究,所以后來就誕生了光柵型的儀器。最先推出光柵型多功能酶標(biāo)儀是MD公司。

光柵掃描酶標(biāo)儀的推陳出新,使得用戶在波長選擇上不再受限,如上海閃譜生物科技公司的SP-Max 2300A光柵型全波長酶標(biāo)儀,光譜范圍可達(dá)190nm-1000nm,波長任意可調(diào),而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng)。有的還可實(shí)現(xiàn)實(shí)現(xiàn)了帶寬連續(xù)可調(diào),如SP-Max 3500型多功能全波長熒光酶標(biāo)儀。這些都是目前濾光片型酶標(biāo)儀所不能或者較難實(shí)現(xiàn)的。目前,光柵型全波長酶標(biāo)儀已經(jīng)成為了科研主流。

二、雜光率低,波長準(zhǔn)確性高

光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,最關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準(zhǔn)確性了。

雜光率指得就是光源通過光柵后,得到的光線中,“不需要”的波長的光占所標(biāo)稱波長的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性,無論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來說,濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類雜光是非特異的,而且會直接進(jìn)入最后的檢測器,所以有多少的雜光就會引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測過程中,由于檢測器存在放大效應(yīng),雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大。因此,雜光率就是一個(gè)濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。

光柵的另一個(gè)重要指標(biāo)就是波長選擇的準(zhǔn)確性。因?yàn)楹芏鄼z測是依賴于物質(zhì)在某個(gè)波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定,實(shí)際檢測波長偏離260nm幾個(gè)nm以上的話,OD值與最終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會發(fā)生改變。因此,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),他的波長選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5~1nm之間。波長偏離過大有時(shí)就會影響到最終結(jié)果的準(zhǔn)確性,而上海閃譜生物科技公司的SP-Max 3500型、SP-Max 2300A光柵型全波長掃描儀的波長選擇準(zhǔn)確性可達(dá)±0.2nm,為業(yè)界*。

這兩個(gè)參數(shù)可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)最關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結(jié)果,是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的最基本要求。 

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