產(chǎn)品介紹：

　本試劑盒適合于從新鮮或冷凍的動(dòng)物組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等多種樣品中提取高純度總DNA。本品可純化獲得分子量最大為50 kb的核酸片段，純化過(guò)程不需使用苯酚或氯仿等有毒溶劑，無(wú)需乙醇沉淀。本試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系使裂解液中的DNA高效特異的結(jié)合到硅基質(zhì)離心吸附柱上，PCR和其他酶促反應(yīng)的抑制劑可通過(guò)兩步洗滌步驟被有效去除，最后使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可得到高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern Blot、分子標(biāo)記等下游實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品名稱(chēng)：康為世紀(jì) 柱式基因組DNA提取試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：CW2298M

產(chǎn)品組份：

自備試劑：

無(wú)水乙醇

Enzymatic Lysis Buffer（提取革蘭氏陽(yáng)性菌基因組DNA時(shí)須準(zhǔn)備）。

Enzymatic Lysis Buffe配方：20 mM Tris，pH8.0；2 mM Na2-EDTA；1.2% Triton

X-100；終濃度為20 mg/ml的Lysozyme（溶菌酶）。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

●簡(jiǎn)單方便:提取速度快，僅需40分鐘即可完成基因組DNA提取。

●高純度:純化得到的DNA ODSen.s.比值在1.7-1.9之間，完整度高(>15 kb)，可用于二代測(cè)序、定量PCR、芯片檢測(cè)等下游實(shí)驗(yàn)。

●高通量:可與液體工作站、磁珠法自動(dòng)純化系統(tǒng)匹配使用。

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng):

1．向Proteinase K中加入用量的Proteinase K Storage Buffer使其溶解，-20℃保存。配制好的Proteinase K勿長(zhǎng)時(shí)間室溫放置，避免反復(fù)凍融，以免影響其活性。

2．樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的核酸片段較小且提取量下降。

3．如果提取次生代謝產(chǎn)物大量積累或細(xì)胞壁厚的細(xì)菌培養(yǎng)物的基因組，建議在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期早期收集樣品。

4．第一次使用前應(yīng)按試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無(wú)水乙醇。

5．使用前請(qǐng)檢查Buffer GTL和Buffer GL是否出現(xiàn)結(jié)晶或者沉淀，如有結(jié)晶或者沉淀，請(qǐng)將Buffer GL和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解。

6．如果下游實(shí)驗(yàn)對(duì)RNA污染比較敏感，可以在加入Buffer GL前加入4 μl DNase-Free的RNase A（100 mg/ml）

操作步驟:

血液及細(xì)胞樣本基因組提取

1．材料處理

1a. 如果提取材料為哺乳動(dòng)物抗凝血液（無(wú)核紅細(xì)胞），可直接向50-200 μl新鮮或冷凍的抗凝血液樣品中加入Buffer GTL補(bǔ)足至200 μl；

1b. 如果提取材料為禽類(lèi)、鳥(niǎo)類(lèi)、兩棲類(lèi)或更低級(jí)生物的抗凝血液，其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞，取5-10 μl新鮮或冷凍的抗凝血液樣品，加入Buffer GTL補(bǔ)足至200 μl；

1c.貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)先處理為細(xì)胞懸液（最大提取量為5×106個(gè)細(xì)胞），2,000rpm（400×g）離心5分鐘，棄盡上清，加200 μl GTL，振蕩至樣品*懸??；

2．加入20 μl Proteinase K。

3．加入200 μl Buffer GL，渦旋震蕩充分混勻，56℃水浴10分鐘。

4．短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。加入200 μl無(wú)水乙醇，渦旋震蕩充分混勻。短暫離心。

5．上一個(gè)步驟中所得溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱（Spin Columns DM）中，若一次不能加完溶液，可分多次轉(zhuǎn)入。12,000 rpm（～13,400 ×g） 離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

6．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1（使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000 rp離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

7．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2（使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

8．12,000 rpm離心2分鐘，倒掉收集管中廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘，以*晾干。

9．將吸附柱置于一個(gè)新的離心管（自備）中，向吸附柱的中間部位懸空加入50-200 μlBuffer GE或滅菌水，室溫放置2-5分鐘，12,000 rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

保存條件：室溫（15-30℃）

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

品牌             貨號(hào)                   名稱(chēng)                                     規(guī)格

康為世紀(jì)  CW2298M    Universal Genomic DNA Kit     200preps

產(chǎn)品名稱(chēng)：康為世紀(jì) 柱式基因組DNA提取試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：CW2298M

關(guān)于公司：

康為世紀(jì)是主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn)，為生命科學(xué)研究、基因檢測(cè)和體外診斷用戶(hù)提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù)?？禐槭兰o(jì)建立了專(zhuān)業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開(kāi)放式的合作創(chuàng)新平臺(tái)，構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。產(chǎn)品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護(hù)劑、核酸提取試劑盒、分子診斷檢測(cè)試劑等，打破了中國(guó)生物研究與產(chǎn)業(yè)對(duì)進(jìn)口試劑的依賴(lài)。

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