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NGS文庫DNA擴(kuò)增高保真熱啟動(dòng)聚合酶預(yù)混液

KAPA HiFi HotStart ReadyMix是一種DNA擴(kuò)增預(yù)混液，包含引物和模板之外擴(kuò)增*反應(yīng)必需成分。預(yù)混液所含KAPA HiFi DNA Polymerase是新型改造B族DNA聚合酶，錯(cuò)誤率比野生型Taq DNA聚合酶低約100倍，成功率和產(chǎn)率比野生型B族proofreading活性的DNA聚合酶更高。適用于NGS文庫。

KAPA HiFi HotStart ReadyMix高保真DNA聚合酶預(yù)混液

英文名稱：KAPA HiFi HotStart ReadyMix

中文名稱：KAPA HiFi高保真熱啟動(dòng)DNA聚合酶預(yù)混液

品牌：KAPA

用于克隆和蛋白質(zhì)表達(dá)或基因組表征的DNA核酸片段的擴(kuò)增，高保真PCR，新一代測(cè)序NGS文庫擴(kuò)增，定點(diǎn)突變。

聚合酶預(yù)混液DNA擴(kuò)增特點(diǎn)

高DNA親和力，無需輔助蛋白和DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域

高持續(xù)合成能力

長片段擴(kuò)增能力

選擇失活，低非特異性擴(kuò)增

KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶是一種新型B家族DNA聚合酶，經(jīng)過工程改造后對(duì)DNA的親和力增加，不需要輔助蛋白或DNA結(jié)合域。與野生型B家族DNA聚合酶相比，該酶固有的高持續(xù)合成能力可顯著提高合成產(chǎn)量，速度和靈敏度。此外，擴(kuò)增長片段以及富含GC和AT片段的能力顯著提高。該酶與*抗體結(jié)合，*次變性步驟之前可以保持失活狀態(tài)。這可以防止反應(yīng)過程中的非特異性擴(kuò)增，提高靈敏度，并提高反應(yīng)效率。

KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase is a novel B-family DNA polymerase, engineered to have increased affinity for DNA, without the need for accessory proteins or DNA binding domains. The intrinsic high processivity of the enzyme results in significant improvement in yield, speed and sensitivity when compared with wild-type B-family DNA polymerases. In addition, the ability to amplify long targets, as well as GC- and AT-rich targets, is significantly improved. The enzyme is combined with a proprietary antibody that inactivates the enzyme until the first denaturation step. This prevents nonspecific amplification during reaction setup, increases sensitivity, and improves reaction efficiency.

組份（除引物和模板的擴(kuò)增反應(yīng)液）

DNA聚合酶+緩沖液混合：

DNA聚合酶：0.5U /25μL反應(yīng)

緩沖液：dNTPs（每種dNTP 0.3mM，1X），MgCl₂（2.5mM，1X ）和穩(wěn)定劑

高保真熱啟動(dòng)聚合酶技術(shù)參數(shù)

聚合酶種類：改造B族DNA聚合酶

聚合酶活性：KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶具有5'g3'聚合酶和3'g5'核酸外切酶（proofreading）活性，但沒有5'g3'核酸外切酶活性。

擴(kuò)增片段長度：可從基因組DNA中擴(kuò)增高達(dá)15kb的目標(biāo)或從較不復(fù)雜的目標(biāo)擴(kuò)增20kb。

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預(yù)混液設(shè)計(jì)用于各種目標(biāo)和大小片段的常規(guī)高保真PCR。它的錯(cuò)誤率比野生型Taq DNA聚合酶低約100倍，成功率和產(chǎn)率比野生型B家族（proofreading）DNA聚合酶更高。另外，KAPA HiFi HotStart比野生型B家族DNA聚合酶需要更短的反應(yīng)時(shí)間。 KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶具有5'g3'聚合酶和3'g5'核酸外切酶（proofreading）活性，但沒有5'g3'核酸外切酶活性。

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KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預(yù)混液應(yīng)用

KAPA HiFi熱啟動(dòng)PCR試劑盒非常適合：

用于常規(guī)測(cè)序的PCR（直接測(cè)序或克隆PCR產(chǎn)物的測(cè)序）

新一代測(cè)序文庫擴(kuò)增（與KAPA文庫擴(kuò)增方案配合使用時(shí)）

擴(kuò)增DNA核酸片段用于克隆和蛋白質(zhì)表達(dá)或基因組表征

定點(diǎn)突變

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預(yù)混液產(chǎn)生的DNA核酸片段可用于常規(guī)下游分析和應(yīng)用，包括限制性內(nèi)切酶消化，克隆和測(cè)序。KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預(yù)混液產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物是平端的，但可以加3'-dA-尾以克隆到TA載體中。

Quick Notes

• KAPA HiFi HotStart ReadyMix PCR Kits contain the engineered KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase –developed for fast and versatile high-fidelity PCR.

• Buffer, MgCl2 , dNTPs and enzyme are supplied in a convenient 2X ReadyMix – just add primers and template.

• KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase has the lowest published error rate of all B-family DNA polymerases (1 error per 3.6 x 106  nucleotides incorporated).

• Amplify targets up to 15 kb from genomic DNA or 20 kb from less complex targets.

• Denature at 98°C for 20 sec per cycle.

• Optimal annealing temperatures are typically higher than in other PCR buffer systems. Use an annealing temperature gradient to determine the optimal annealing temperature.

• To ensure the highest fidelity, use high quality DNA and the lowest possible number of cycles.

KAPA Biosystems是一家美國生物公司，成立于2006年，其生產(chǎn)基地位于南非開普敦。KAPA Biosystems致力于研發(fā)、生產(chǎn)下一代PCR（Next-Generation PCR）所需的生物酶。目前其分子進(jìn)化平臺(tái)開發(fā)的產(chǎn)品已被廣泛應(yīng)用于DNA擴(kuò)增、二代測(cè)序、分子診斷等領(lǐng)域。

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預(yù)混液訂購信息

KK2600（） KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 0.25 mL

KK2601（） KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 1.25 mL

KK2602（ ）KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 6.25 mL

* Contains 2.5 mM MgCl₂ at 1X

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