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你知道重組細胞因子的要求有哪些么
閱讀：2058發(fā)布時間：2020-7-27
細胞因子是由免疫細胞(如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等)和某些非免疫細胞(內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等)經刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學活性的小分子蛋白質。通過結合相應受體調節(jié)細胞生長、分化和效應，調控免疫應答。
細胞因子(cytokine，CK)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產生的低分子量可溶性蛋白質，具有調節(jié)固有免疫和適應性免疫、血細胞生成、細胞生長、APSC多能細胞以及損傷組織修復等多種功能。細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等。
下面重組細胞因子要求:
1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。
2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。
3. 生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo)活性檢測。
4. 蛋白含量:通過紫外光譜分析，SDS-PAGE電泳檢測;必要時應用HPLC定量標準蛋白溶液。
5. 內毒素:kinetic LAL法檢測內毒素。
6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經過濾除菌處理。
重組細胞因子的狀態(tài):
市場上主流的重組蛋白產品，多在不含載體蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的條件下，以低鹽的形式做凍干處理，因此微量(多以微克計量)的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內，形成很薄或不可見的蛋白層，所以建議在收到試劑后，務必于開蓋前先離心20-30秒，使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于凍干館的底部(此時能否見到白色沉淀均屬正?，F(xiàn)象)。
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