透明室-用于組織透明化樣品的成像室
透明室是在使用顯微鏡觀察組織透明化樣品時(shí)使用的觀察容器。透明室由10套硅橡膠板、蓋玻片和載玻片組成，它能讓您輕松地觀察組織透明化后的樣品。其中有五種厚度的硅橡膠可供作墊片，分別為0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm，可根據(jù)您的樣品選擇所需尺寸。

用于組織透明化樣品的成像室

透明室

 

 

 

透明室是在使用顯微鏡觀察組織透明化樣品時(shí)使用的觀察容器。透明室由10套硅橡膠板、蓋玻片和載玻片組成，它能讓您輕松地觀察組織透明化后的樣品。其中有五種厚度的硅橡膠可供作墊片，分別為0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm，可根據(jù)您的樣品選擇所需尺寸。

硅橡膠板的兩側(cè)貼有保護(hù)膜，可在使用時(shí)剝離，從而使載玻片與蓋玻片緊密接觸。

 

 

 

 

◆透明化工序（使用SeeDB時(shí)）

 

1. 在4°C下用4％多聚甲醛/ PBS固定小鼠大腦，過(guò)夜。

2. 用PBS清洗3次樣品（各10 min）。

3. 將樣品放入裝有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中。在室溫下，用旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)試管

3. 4~8 h（月4 rpm）。易損的樣品和切片可使用蹺蹺板振蕩搖床。（約17 rpm）。

4. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB：40 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)4~8 h。

5. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB：60 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)4~8 h。

6. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB：80 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)12 h。

7. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB：100 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)12 h。

8. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)24 h。

 

 

圖1. 使用SeeDB的生物體樣品的透明化

 

從左至右分別為使用SeeDB透明化處理的小鼠胎兒（胎兒12天），新生小鼠（生后3天）的全腦，成年小鼠大腦切片（8周齡，厚度2 mm）的案例。

 

 

 

◆安裝方法

 

1. 使用與樣品尺寸相匹配的透明室

2. 使用SeeDB時(shí)，請(qǐng)使用SeeDB液安裝樣品。

*若樣品較小，觀察時(shí)會(huì)移動(dòng)的話可使用瓊脂糖凝膠等固定樣品。

 

 

 

◆觀察

 

1. 使用激光共聚焦顯微鏡或雙光子激發(fā)顯微鏡觀察SeeDB處理的大腦樣品。

 

*使用SeeDB透明化處理的樣品的折射率較高，為1.49。因此雖然適用于甘油浸沒(méi)透鏡，油浸透鏡以及透明化用透鏡，但是水浸透鏡的

*使用深度只達(dá)約2 mm。浸泡液請(qǐng)使用各廠商推薦的浸泡液。請(qǐng)不要使用SeeDB液作為浸泡液。使用空氣物鏡（折射率1.0）或水浸物

*鏡（折射率1.33）獲得圖像時(shí)，深度的數(shù)值需進(jìn)行校正。（校正公式請(qǐng)參閱參考文獻(xiàn)）。

 

 

◆觀察實(shí)例

 

 

圖2. 使用雙光子激發(fā)顯微鏡獲得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周齡）大腦熒光圖像

 

 

 

圖3. 使用共焦距顯微鏡獲得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周齡）大腦熒光圖像

 

 

◆產(chǎn)品列表

 

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品等級(jí)
294-35631	透明室，0.3 mm厚	10 set	組織光學(xué)透明試劑
291-35641	透明室，0.5 mm厚	10 set	組織光學(xué)透明試劑
295-35661	透明室，1.0 mm厚	10 set	組織光學(xué)透明試劑
292-35671	透明室，2.0 mm厚	10 set	組織光學(xué)透明試劑
299-35681	透明室，3.0 mm厚	10 set	組織光學(xué)透明試劑

 

 

◆相關(guān)產(chǎn)品

 

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	包裝	規(guī)格
291-79601	SeeDB實(shí)驗(yàn)試劑盒	1 kit	組織透明化
193-18391	SeeDB:20w/v% 果糖溶液	250 mL	組織透明化
196-18401	SeeDB:40w/v% 果糖溶液	250 mL	組織透明化
193-18411	SeeDB:60w/v% 果糖溶液	250 mL	組織透明化
190-18421	SeeDB:80w/v% 果糖溶液	250 mL	組織透明化
197-18431	SeeDB:100w/v% 果糖溶液	250 mL	組織透明化
194-18441	SeeDB 深層透明化試劑	250 mL	組織透明化
160-16061	多聚甲醛	100 g	組織固定用
162-16065		500 g
164-25511	1×PBS(-)平衡緩沖液	5 L	生化學(xué)用
045-33421	細(xì)胞膜橙紅色熒光探針	10 mg	細(xì)胞生物學(xué)用
041-33423		50 mg