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上海信裕生物科技有限公司
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HEK293-eGFP-puro(人胚腎細(xì)胞)

參   考   價: 3300

訂  貨  量: ≥1 瓶

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌信裕生物

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時間:2025-04-16 15:20:18瀏覽次數(shù):598次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
純度 99% 供貨周期 現(xiàn)貨
規(guī)格 1*10^6cells/T25 貨號 XY-H371EP
應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 主要用途 僅用于科研
HEK293-eGFP-puro(人胚腎細(xì)胞)Luciferase HEK-293細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢光蛋白。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持??捎米魑灩獾鞍谆钚詸z測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實(shí)驗(yàn)。

HEK293-eGFP-puro(人胚腎細(xì)胞)

規(guī)格:1×106cells/T25 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長

傳代:1:2至1:3,每周3次

培養(yǎng)基::90% DMEM+10% FBS+PS

培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

HEK293-eGFP-puro(人胚腎細(xì)胞)   

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱HEK293-eGFP-puro(人胚腎細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記)
細(xì)胞別稱HEK293-EGFP-PURO,人腎上皮細(xì)胞系+EGFP;人胚腎細(xì)胞株-綠色熒光蛋白標(biāo)記
種屬來源
組織來源胚胎腎
生長特性貼壁生長
細(xì)胞代數(shù)p3-p8
背景介紹

Luciferase HEK-293細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢光蛋白。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持。可用作螢光蛋白活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實(shí)驗(yàn)。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。 
HEK-293細(xì)胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,HEK-293細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,293 HEK-293細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點(diǎn)的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。
puro藥篩濃度該細(xì)胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml,培養(yǎng)過程中可不用再添加puro,如若擔(dān)心抗性隨著傳代時間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持。
Luciferase活性檢測HEK293-eGFP-puro(人胚腎細(xì)胞)
HEK293-eGFP-puro 熒光檢測報(bào)告下載
生物安全等級2
細(xì)胞規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測
保藏機(jī)構(gòu)ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602
培養(yǎng)基90% DMEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞貨期1-2周
運(yùn)輸方式復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
  二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)收到細(xì)胞后,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)第三天換液并檢查細(xì)胞密度
傳代比例傳代建議1:2傳代
 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細(xì)胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
注意事項(xiàng)

1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 

2.因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。

1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存;
2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。

到貨須知

1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

3.由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

  三.細(xì)胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞密度待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
  四、售后服務(wù)
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)

1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);

2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);

3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);

4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);

5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);

6.細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);

7.視具體情況而定。

不予重發(fā)

1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā);

2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā);

5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);

6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);

7.視具體情況而定。



僅用于科研,不能用于臨床診斷!所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于人或動物的治療等任何其他用途,不為任何個人提供產(chǎn)品和服務(wù)。以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。

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