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Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒Solarbio生產(chǎn)的細(xì)胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死檢測(cè)方法。    本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方法。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，染色質(zhì)會(huì)固縮。Hoechst33342可以穿透細(xì)胞膜，染色后凋亡細(xì)胞熒光會(huì)比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。碘化丙啶(PI)不能穿透細(xì)胞膜，對(duì)于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。而對(duì)于壞死細(xì)胞，其細(xì)胞膜的完整性喪失，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細(xì)胞。上述兩種染料雙染后，使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè)時(shí)，正常細(xì)胞為弱紅色熒光＋弱藍(lán)色熒光，凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光＋強(qiáng)藍(lán)色熒光，壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光＋強(qiáng)藍(lán)色熒光。參考下圖，左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細(xì)胞，右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細(xì)胞。

染色快速方便，兩種染料的染色僅需20-30分鐘，一步染色即可完成。    使用方便，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，無需稀釋等配制過程，也無需再準(zhǔn)備其它任何溶液。    本試劑盒足夠檢測(cè)100個(gè)樣品，每個(gè)樣品的細(xì)胞數(shù)量可以為1×10⁵-1×10⁶。

Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒產(chǎn)品內(nèi)容：

                                        100T     500T

細(xì)胞染色緩沖液                100ml   500ml

Hoechst染色液                 0.5ml   2.5ml

PI染色液                          0.5ml   2.5ml

說明書                             1 份     1 份

使用說明：

1. 每個(gè)樣品收集約10-100萬細(xì)胞于1.5ml離心管內(nèi)，離心棄上清。細(xì)胞沉淀用0.8-1ml細(xì)胞染色緩沖液重懸。

2. 加入5微升Hoechst染色液。

3. 加入5微升PI染色液。

4. 混勻，冰浴或4℃孵育20-30分鐘。

5. 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)紅色熒光和藍(lán)色熒光。

6. 如果使用熒光顯微鏡檢測(cè)，檢測(cè)前離心沉淀細(xì)胞，用PBS洗滌一次，再涂片觀察紅色熒光和藍(lán)色熒光。對(duì)于貼壁細(xì)胞使用熒光顯微鏡檢測(cè)，可以不收集細(xì)胞，直接依次按照上述比例加入細(xì)胞染色緩沖液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分鐘。染色后PBS洗滌一次，再在熒光顯微鏡下觀察。

注意事項(xiàng)：

需使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行紅色和藍(lán)色雙熒光檢測(cè)。也可使用熒光顯微鏡檢測(cè)。 染色后宜盡快檢測(cè)。

Hoechst 33342對(duì)人體有害，碘化丙啶(PI)對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操