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BC0625-甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒
  • BC0625-甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒
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貨物所在地:北京北京市

地: 北京

更新時間:2025-03-23 21:00:07

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甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒
測定意義:TG是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細(xì)胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。
測定原理:用異丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,過碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì),在420 nm有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。

甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

操作步驟:

一、 TG 的提?。?/p>

1、 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清待測。

2、 細(xì)胞、細(xì)菌:先收集 400-500 萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,加 1mL 試劑一,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20%,超聲 2s,停 1s),8000g, 4℃離心 10min,取上清待測。

3、 血清(漿)等液體樣品:直接測定。

二、 測定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長到 420 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 水浴鍋預(yù)熱到 65℃??瞻坠?標(biāo)準(zhǔn)管 測定管雙蒸水(μL) 40 標(biāo)準(zhǔn)液(μL) 40 TG 待測液(μL) 40 試劑一(μL) 125 125 125 試劑二(μL) 25 25 25 加試劑一后充分混勻,再加試劑二,劇烈振蕩 30s,靜置,待分層后取上層溶液 30μL,置于新的 EP 管中。

3.甘油三酯含量測定:空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測定管上層溶液(μL) 30 30 30 試劑三 (μL) 100 100 100 試劑四(μL) 30 30 30 充分混勻,65℃水浴 3min 試劑五(μL) 100 100 100 試劑六(μL) 100 100 100 充分混勻,65℃水浴 15min 取出 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板測定 420nm 處吸光度,記為 A 空,A 標(biāo)和 A 測。注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

a.使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

1. 血清(漿)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)×100 mL =100×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL;100mL:血清體積,1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含量: (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算 TG 含量(mg/ mg prot)= C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷Cpr =(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷ Cpr (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算 TG 含量(mg/ g)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷W =(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷ W C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /mL) =(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /mL) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL。

b.使用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下

1. 血清(漿)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)×100 mL =100×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL;100mL:血清體積,1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含量: (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算 TG 含量(mg/ mg prot)= C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷Cpr =(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷ Cpr (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算 TG 含量(mg/ g)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷W =(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷ W C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /mL) =(A 測-A 空)÷(A 標(biāo)-A 空)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /mL) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì),實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩,試劑瓶蓋打開后應(yīng)該及時蓋緊。

2. 加試劑二后需劇烈震蕩,使待測液中甘油三酯得到充分提取。

3. 檢出限為 100μ mol/L。

甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

試劑一:自備,取玻璃空瓶,加入 45mL 正庚烷,80mL 異丙醇,蓋緊后混勻,4℃保存。

劑二:液體 3mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑五:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑六:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。標(biāo)準(zhǔn)品:液體 5mL×1 瓶,1mg/mL 甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)溶液,4℃保存。

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