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貨物所在地:北京北京市
所在地: 北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷
更新時(shí)間:2024-09-08 21:00:06
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多酚氧化酶(PPO)活性檢測試劑盒
測定意義:PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。
測定原理:PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在525nm有特征光吸收。
需要的儀器,耗材:可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
多酚氧化酶檢測試劑盒(分光光度法)說明書
貨號:BC0190
規(guī)格: 50管/24樣
多酚氧化酶(PPO)活性檢測試劑盒產(chǎn)品簡介:
PPO主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。
PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在525nm有特征光吸收。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體,60ml×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體,40ml×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體,10ml×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體,20ml×1瓶,4℃保存
操作步驟:
一、粗酶液提取:
二、測定操作表:
試劑名稱(μl) | 測定管 | 對照管 |
試劑一 | 600 | 600 |
試劑二 | 150 | 150 |
樣本 | 150 |
|
煮沸的樣本 |
| 150 |
37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)中準(zhǔn)確水浴10min后,迅速放入冰浴中冷卻 | ||
試劑三 | 300 | 300 |
充分混勻,5000g,常溫離心10min,收集上清,用蒸餾水調(diào)零,525nm處檢測測定管和對照管吸光度。
注意:每個(gè)測定管需要設(shè)置一個(gè)對照管,可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn)行1min沸水浴處理
多酚氧化酶(PPO)活性檢測試劑盒 PPO活性計(jì)算:
1、血清、血漿或果汁PPO活性計(jì)算
單位定義:每分鐘每毫升樣品在每毫升反應(yīng)體系中使525nm吸光值變化0.01為一個(gè)酶活力單位
PPO(U/mL)=(A測定-A對照)×反應(yīng)總體積÷(V液*×V樣*÷V樣總*) ÷0.01÷反應(yīng)時(shí)間
=80×(A測定-A對照)÷V液*
2、組織中PPO活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每mg組織蛋白在每毫升反應(yīng)體系中使525nm處吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
PPO(U/mg prot)=反應(yīng)總體積(1200μl)÷樣本體積(150μl)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A測定-A對照)÷蛋白濃度(mg/ml)=80×(A測定-A對照)÷蛋白濃度(mg/ml)
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每g組織蛋白在每毫升反應(yīng)體系中使525nm處吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
PPO(U/g 鮮重)=反應(yīng)總體積(1200μl)÷樣本體積(150μl)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A測定-A對照)÷樣本鮮重(g/ml)=80×(A測定-A對照)÷樣本鮮重(g/ml)
3、按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每毫升反應(yīng)體系中使525nm處吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
PPO(U/104 cell)=反應(yīng)總體積(1200μl)÷樣本體積(150μl)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A測定-A對照)÷細(xì)菌或細(xì)胞密度(104/ml)=80×(A測定-A對照)÷500*
*V液:加入的血清、血漿或果汁的體積
*V樣:加入樣本體積
*V樣總:加入提取液體積
*500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)500萬
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)