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P4480-魚全血單個核細胞分離液試劑盒
  • P4480-魚全血單個核細胞分離液試劑盒
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貨物所在地:北京北京市

地: 北京

更新時間:2025-03-03 21:00:07

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魚全血單個核細胞分離液試劑盒
貨號:P4480
規(guī)格:200ml/KIT
保存:室溫避光儲存,有效期少 2 年。

魚全血單個核細胞分離液試劑盒
貨號:P4480
規(guī)格:200ml/KIT
保存:室溫避光儲存,有效期少 2 年。

 

產(chǎn)品組成:

名稱                                 規(guī)格
各種動物外周血單個核細胞分離液       100ml×2
全血及組織稀釋液(贈品)             100ml
細胞洗滌液(贈品)                   100ml


產(chǎn)品簡介:
    本分離液為Ficoll、羥乙基淀粉550與泛影酸葡甲胺的混合液??鼓庵苎稍诜蛛x液中分層。離心時,在Ficoll、羥乙基淀粉的作用下紅細胞與粒細胞聚集并迅速沉降;此時,單個核細胞仍處于分離液上層,紅細胞污染可忽略不計。大部分血小板可在細胞清洗低速離心過程中去除。 其他人及動物多種比重細胞分離液,因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同,用戶在制定分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。
適用于從動物抗凝血液中分離單個核細胞,無菌條件下所分離的單個核細胞可用于細胞培養(yǎng)等。本品僅供科研使用。


器材和設(shè)備 :
    400g離心力的水平轉(zhuǎn)子離心機、15ml玻璃離心管、吸管等。


注意事項:
    A.本實驗要求,在正常大氣壓下,分離液、分離樣本以及分離環(huán)境溫度為20℃±2℃。分離液在低溫時呈較高密度,在高溫時呈較低密度。細胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,操作前可將樣本和分離液復(fù)溫18-22℃。為獲得佳的實驗結(jié)果,在取血后2小時內(nèi)進行實驗,血液提取后存放時間越長細胞活性越低。
    B.實驗過程中,如需稀釋血液或洗滌細胞,不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會導(dǎo)致血細胞凝集,大大降低細胞得率及純度。
    C.優(yōu)抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素,其他抗凝劑也可使用,但會影響細胞活性。應(yīng)注意在血液稀釋過程中去除抗凝劑體積。
    D.當(dāng)血液樣本粘度過高或血液樣本大于等于3ml時,優(yōu)稀釋方法:將血液于18-22℃以250g離心10分鐘,棄去血漿,補充添加全血及組織稀釋液,添加量為所棄去血漿體積的1.5-2倍,混勻備用。注:不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞档图毎寐始盎钚浴?br />    E.實驗操作時,不可使用含粉手套、不可使用內(nèi)毒素含量過高的液體,手套中的粉末顆粒及高內(nèi)毒素會激活淋巴細胞從而降低細胞得率及活性。
    F.本實驗不可使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,其帶有的靜電作用將導(dǎo)致細胞貼壁影響分離效果。推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。
    G.吸取過多的單個核細胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數(shù)量增加。吸取過多的單個核細胞層上層溶液會導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。
    H.如需進行細胞計數(shù),則需血液貯藏時間不得多于10小時,否則將導(dǎo)致細胞被激活,得率降低。
    I.為去除所混雜的血小板,可在分離液上層加上4-20%蔗糖梯度等滲溶液進行二次離心。
    J.細胞純度可在步驟10后使用瑞氏染色方法確定,細胞活性可用臺盼藍處理后觀察。

    K.由于各品牌離心機的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時間,摸索佳的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。
 

分離方法 :
     一、當(dāng)血液樣本小于3ml時,實驗方法如下:
     1. 取一支15ml離心管,加入3ml分離液置于18-22℃復(fù)溫。
     2. 將血液樣本小心加于分離液之液面上。18-22℃,400g離心20分鐘。低溫(如4℃)離心會降低細胞得率。
     3. 離心后,用吸管小心吸出分離液上層(包含單個核細胞的細胞層)0.5cm以上的上清液部分,棄去。
     4. 用吸管小心吸取分離液層及淋巴細胞層于另一新離心管內(nèi)。
     5. 在步驟4中所得離心管中加入10ml細胞洗滌液混勻。
     6. 250g離心10分鐘。
     7. 棄上清。
     8. 用吸管以5ml細胞洗滌液重懸所得細胞。
     9. 250g離心10分鐘。
     10. 棄上清。重復(fù)步驟7、8、9,后以0.5ml后續(xù)試驗所需相應(yīng)液體重懸細胞。


二、當(dāng)血液樣本大于3ml時,實驗方法如下:
     1. 先按“【注意事項】D項”所述方法稀釋血液樣本。
     2. 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管,加入分離液(加入量與稀釋后的血液樣本體積相等),置于18-22℃復(fù)溫。
     3. 將經(jīng)稀釋處理的血液樣本小心加于分離液之液面上。18-22℃,400g離心20分鐘。低溫(如4℃)離心會降低細胞得率。注:加入血液樣本后,樣本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二。
     4. 剩余步驟同“情況一”中步驟3步驟10。

產(chǎn)品性能 指標(biāo) :
pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
無菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10µm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
含25µm 以上的不溶性微粒5 粒以下


貯藏及保存期限 :
     本分離液是敏光型的,應(yīng)在18℃-25℃避光保存,有效期兩年。啟封后置4℃保存,溶液變渾濁或污染細菌時,產(chǎn)品失效。保存溫度較低(10℃以下)時分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

 

魚全血單個核細胞分離液試劑盒訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


魚全血單個核細胞分離液試劑盒運輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。

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