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Z0005 引物合成5-OD 索萊寶自產(chǎn)
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更新時間:2024-08-23 09:36:25瀏覽次數(shù):1714評價

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Z0005 引物合成5-OD 索萊寶自產(chǎn)
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Z0005 引物合成5-OD 索萊寶自產(chǎn)

引物合成是通過測定引物的OD值,溶解引物,終合成引物的一個完善的過程。

目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。亞磷酰胺三酯法合成DNA的片段,具有高效、快速的偶聯(lián)以及起始反應物比較穩(wěn)定的特點。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體上完成DNA鏈的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相鄰的核苷酸通過3′→5′磷酸二酯鍵連接。

引物合成特點

1.引物合成的純度高。

2.合成的序列長。

3.合成的效果好。

引物純化方式

1.C18柱脫鹽:有人稱其為簡易反相柱,它對DNA有特異性的吸附,可以被有機溶解洗脫,但不會被水洗脫,所以能有效地去除鹽分。它不能有效去除比目的片段短的小片段。這種方法一般不會對普通PCR反應產(chǎn)生影響。對于需要用于測序、克隆的引物不能使用這個。

2.OPC純化: OPC純化是根據(jù)DNA保護基(DMTr基)和Cartridge柱中樹脂間的親合力作用的原理進行純化目的DNA的片段。

3.PAGE純:PAGE純化法是使用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,對DNA的片段進行分離,然后從凝膠中回收目的DNA的方法。PAGE純化法也是一種非常有效的DNA純化方法,純化后的DNA純度大于95%,對長鏈Oligo DNA (大于50mer)的純化特別有效。

4.HPLC純化:HPLC純化是使用高效液相色譜的原理,對DNA的片段進行純化。純度可以大于99%。主要用于短鏈和修飾引物的純化。


5引物的OD數(shù)的定量

用紫外分光光度計,波長260nm,石英比色杯,光程為1厘米,測定溶液的光密度。測定時溶液的光密度好稀釋到0.2-1.0之間。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后,用1ml水稀釋測OD值。需要根據(jù)稀釋倍數(shù)換算出母液的OD值。

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