目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學(xué)>>PAGE凝膠銀染試劑盒>> 1LG7210 PAGE凝膠銀染試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1L |
|---|---|---|---|
| 貨號 | G7210 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比考馬斯亮藍(lán)高,該產(chǎn)品整個(gè)過程操作簡單 |
G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒
規(guī)格: 1L
保存: 室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復(fù)檢期12 個(gè)月。
試劑盒內(nèi)容：
**銀 2g
染色液A 100ml
顯色液B 100ml
顯色液C 100ml
終止液D 100ml
注：1L 規(guī)格指可配制的**銀染色液的體積，實(shí)際使用次數(shù)根據(jù)PAGE 膠大小不同而不同。
二、G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒的簡介:
核酸銀染的原理是銀離子可與核酸形成穩(wěn)定的復(fù)合物，然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使Ag+還原成銀
顆粒，可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比EB 高200 倍，該產(chǎn)品
整個(gè)過程只需要20 分鐘，操作簡單，靈敏度高，能檢測到10ng 以下的DNA 條帶。
三、的使用操作步驟:
一、染色液配制
需要配制的染色液體積根據(jù)PAGE 膠的大小而定，一般的mini-PAGE 膠需要20-30mL。配制用的器皿清洗
干凈后用去離子水涮洗，染色液須用去離子水配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。如果配制的溶液體積不是100mL，可以按比例
改變各成分用量。
1，**銀染液：稱取0.2g **銀，加入到90ml 去離子水中*溶解，加入10ml 溶液A 混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配。
2，顯色液：分別取溶液B 和溶液C 各10ml 加入80ml 去離子水中混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配。
3，終止液：取終止液D 10ml 加去離子水稀釋100ml，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二、：
1，PAGE 電泳結(jié)束后，將PAGE 蛋白膠轉(zhuǎn)移玻璃平皿或搪瓷盤中，用去離子水漂洗兩遍，每次2min。
2，將PAGE 膠轉(zhuǎn)移**銀染液中，使染液沒過PAGE 膠，室溫染色10min。可置于搖床上緩慢搖晃，使
其染色均勻。
3，棄去染色液，用去離子水快速漂洗三次，每次半分鐘。
4，將PAGE 膠轉(zhuǎn)移顯色液中，使顯色液沒過PAGE 膠，室溫?fù)u晃顯色條帶清晰可見。
5，可選，將PAGE 膠轉(zhuǎn)移終止液中，終止顯色1min。
6，銀染后PAGE 膠可拍照保存或用于后續(xù)試驗(yàn)。
四、PAGE 凝膠快速銀染試劑盒的注意事項(xiàng)：
1. 銀染主要出現(xiàn)在PAGE 膠的表面，使用薄膠（0.5-0.75mm）可以提高靈敏度。
2. 對于考馬斯亮藍(lán)染色的SDS-PAGE 膠，可用甲醇將膠漂洗后，繼續(xù)進(jìn)行銀染?？既具^程中的乙酸會(huì)干
擾銀染，因此要確保將PAGE 凝膠中殘留的乙酸*洗凈。
3. 不同蛋白質(zhì)對銀染的反應(yīng)是不一樣的，尤其是堿性蛋白染色效果差。因此，不宜用銀染測定不同蛋白
的比例。
4. 染色過程中，緩慢的振蕩是必要的，一般選擇40-60 rpm.
5. 凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致，所以全程中都應(yīng)帶手套操作。
6. PAGE 凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質(zhì)引起的，所以溶液的配制應(yīng)使用電導(dǎo)率小于1 μS 的去離
子水。
7. 如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現(xiàn)在凝膠表面，可能是在幾步漂洗過程中洗得不夠
*，或是染色過程時(shí)溫度太低。
8. 較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質(zhì)所致。
9. PAGE 膠中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100 和兩性電解質(zhì)這些物質(zhì)會(huì)干擾銀染。
10. 室溫操作時(shí)，溫度的波動(dòng)往往會(huì)干擾銀染的效果，恒溫水浴可以解決這個(gè)問題。
11. 憑借戊二醛預(yù)處理可以使各種蛋白質(zhì)的染色提高40 倍。
12. 染色使用的玻璃器皿必須非常干凈，用酸浸泡可以滿足要求。
13. 銀染應(yīng)盡快照相，隨著時(shí)間延長，蛋白條帶會(huì)變淺，而背景會(huì)加深。
14. 銀染容器理想的是玻璃平皿，其次是搪瓷盤和密胺塑料盤等。
五、與PAGE凝膠快速銀染試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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