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人卷曲蛋白8（FZD8）ELISA Kit
人卷曲蛋白8（FZD8）ELISA Kit是生物醫(yī)學研究與臨床檢測領域用于精準測定人體樣本中卷曲蛋白 8（FZD8）含量的關鍵工具。FZD8 屬于卷曲蛋白家族成員，作為一種跨膜受體蛋白，在細胞信號傳導通路中扮演著至關重要的角色。它參與經典 Wnt/β - 連環(huán)蛋白信號通路以及非經典 Wnt 信號通路的激活，對細胞的增殖、分化、遷移、凋亡等生理過程具有重要調控作用。FZD8 表達異常與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關，準確檢測 FZD8 含量對于深入探究疾病機制、早期診斷及治療方案制定意義重大。
該試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）原理設計。試劑盒內的酶標板預先包被有針對人 FZD8 的高特異性抗體。當含有 FZD8 的樣本，如細胞裂解液、組織勻漿、血清或血漿等加入酶標板孔中時，樣本里的 FZD8 抗原迅速與包被抗體特異性結合，形成抗原 - 抗體復合物。隨后加入酶標記的另一種針對 FZD8 的抗體，該抗體能夠識別已結合在包被抗體上的 FZD8，進而構建起穩(wěn)定的抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。加入酶的底物后，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應，顏色深淺與樣本中 FZD8 的含量呈正相關。通過酶標儀在特定波長下測定吸光度，并與試劑盒所提供的標準曲線比對，即可精確計算出樣本中 FZD8 的含量。
在操作流程方面，規(guī)范采集樣本是首要步驟。以細胞裂解液樣本制備為例，需嚴格遵循細胞培養(yǎng)及裂解的標準操作規(guī)程。培養(yǎng)細胞時要保證細胞處于良好的生長狀態(tài)，收集細胞后，使用合適的裂解液在冰上充分裂解細胞，確保 FZD8 充分釋放且不被降解。從冷藏環(huán)境取出試劑盒后，需將其置于室溫環(huán)境平衡一段時間，使試劑盒各組分達到適宜的反應溫度。嚴格按照說明書，精確吸取適量樣本、不同濃度梯度的標準品以及空白對照，分別加入酶標板相應孔中。加入酶標抗體后，輕輕振蕩使反應體系充分混勻，然后將酶標板放入 37℃恒溫孵育箱中，孵育特定時間，確?？乖贵w反應充分進行。孵育結束，用洗滌緩沖液多次洗滌酶標板，徹di清除未結合的多余物質，降低非特異性干擾。緊接著加入底物溶液，在避光條件下進行顯色反應，在規(guī)定時間內迅速用酶標儀讀取各孔吸光度數值，依據標準曲線確定樣本中 FZD8 的濃度。