預(yù)包被抗原微孔板:提供抗原抗體反應(yīng)的固相載體,保證檢測的特異性和穩(wěn)定性。
酶標(biāo)二抗工作液:含有能特異性結(jié)合軍團(tuán)菌抗體 IgG 的酶標(biāo)二抗,攜帶可催化底物顯色的酶。
標(biāo)準(zhǔn)品:一系列已知濃度的軍團(tuán)菌抗體 IgG 標(biāo)準(zhǔn)品,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以便準(zhǔn)確計(jì)算樣本中抗體濃度。
底物液:與酶標(biāo)二抗上的酶發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生可檢測的顏色變化,從而實(shí)現(xiàn)結(jié)果判讀。
濃縮洗滌液:用于洗滌微孔板,去除未結(jié)合的物質(zhì),降低背景干擾,提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
終止液:用于終止底物反應(yīng),穩(wěn)定顯色結(jié)果,便于酶標(biāo)儀準(zhǔn)確讀取吸光度。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:從冷藏環(huán)境取出試劑盒,平衡至室溫。準(zhǔn)備好所需的樣本和實(shí)驗(yàn)器材,如移液器、酶標(biāo)儀等。
加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品、陰性對照、陽性對照及待測樣本分別加入預(yù)包被微孔板的相應(yīng)孔中,在適宜溫度下溫育,讓抗原抗體充分結(jié)合。
洗滌:用稀釋后的濃縮洗滌液對微孔板進(jìn)行多次洗滌,徹di去除未結(jié)合的物質(zhì)。
加酶標(biāo)二抗:加入酶標(biāo)二抗工作液,溫育使酶標(biāo)二抗與已結(jié)合的 IgG 抗體充分反應(yīng)。
再次洗滌:重復(fù)洗滌步驟,確保洗凈未結(jié)合的酶標(biāo)二抗。
顯色:加入底物液,在避光條件下顯色一定時(shí)間,使顏色充分反應(yīng)。
終止反應(yīng):加入終止液,終止顯色反應(yīng)。
測定:用酶標(biāo)儀在特定波長下測定各孔的吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線判斷樣本中軍團(tuán)菌抗體 IgG 的情況。