自2011年5月1日醉駕入刑以來，人們越來越重視酒后駕駛行為。此外，酒類飲料的主要成分是乙醇，大量飲用高濃度酒可能會造成酒精中毒甚至是死亡,過量飲酒同時也會使行為異常，從而發(fā)生意外甚至犯罪，比如酒后鬧事、醉酒死亡等。因此，在發(fā)生某些自殺、兇殺的案件時，執(zhí)法部門也要首先確定是否有酒精作用因素，所以從這方面來看，測定血液中乙醇的含量也有著至關重大的意義。
儀器和耗材
1儀器
AP 500全自動樣品處理工作站
氣相色譜儀（帶火焰離子化檢測器）
頂空自動進樣器
2 試劑
乙醇、叔丁醇均為色譜純試劑
血液中乙醇標準樣品
樣品提取與前處理
1 樣品前處理
本次方法驗證參考GA/T842—2019《血液酒精含量的檢驗方法》的要求。分別移取100μL血液中乙醇樣品，加入20mL頂空瓶中，然后加入500μL叔丁醇內標工作液，作頂空進樣分析。將頂空瓶及裝有血液中乙醇標準樣品的采血管放入AP 500樣品架中，使用AP 500全自動樣品處理工作站，由工作站全自動完成采血管的抓取與轉移，采血管信息的掃碼錄入，血樣混勻，采血管開蓋與關蓋，血液樣品的抽取與精準分推，頂空瓶的抓取與轉移，頂空瓶的開蓋與鉗蓋密封，頂空瓶內樣品添加與稀釋操作。
2 標準曲線繪制
分別移取100μL系列濃度乙醇標準溶液(5、10、20、50、80、200、300 mg/100 mL)，加入20 mL頂空瓶中，然后均加入500 μL叔丁醇內標工作液，每個濃度點的標準溶液獨立重復測定2次。
3 樣品分析
將AP500全自動樣品處理工作站處理完成的樣品，進行頂空進樣分析。
檢測條件
氣相色譜條件
色譜條件：柱溫：50℃；檢測器：火焰離子化檢測器；檢測器溫度：200℃；進樣口溫度：250℃。頂空自動進樣器，頂空爐溫：65℃；取樣針溫度：90℃；傳輸線溫度：110℃；樣品瓶加熱平衡時間10 min。
回收率與精密度
取同一空白血樣，分別添加乙醇標準溶液，使血液中乙醇的質量濃度分別為120mg / 100mL，平行6份，乙醇平均加標回收率為101%，RSD為1.35。
結果與討論
本次方法驗證滿足GA/T 842—2019《血液酒精含量的檢驗方法》的要求。AP 500全自動樣品處理工作站的設計從如何提高樣品前處理效率的角度考慮，將樣品處理全過程自動化，智能的計算系統(tǒng)幫助實現(xiàn)各種濃度液體的制備，同時設備上集成混勻，掃碼等模塊，可對頂空瓶進行轉移和鉗蓋密封操作，有效地解決了實驗員在血液樣品配制過程中耗時長、操作繁瑣等問題，更重要的是全過程無需實驗員值守，盡可能地減少實驗員與血液、高毒性化學品的接觸，保障實驗員的健康，打造高效安全的實驗室。
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