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REPOTMAARE慢病毒報(bào)告基因是吉滿生物自主研發(fā)的用于檢測(cè)AARE轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報(bào)告基因慢病毒顆粒。隨著氨基酸的消耗，GCN2被激活并且使elF2a磷酸化，這將使ATF的翻譯增加，激活的ATF4將結(jié)合AARE調(diào)控目的基因的表達(dá)。

詳細(xì)介紹

REPO^TMAARE慢病毒報(bào)告基因是吉滿生物自主研發(fā)的用于檢測(cè)AARE轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報(bào)告基因慢病毒顆粒。隨著氨基酸的消耗，GCN2被激活并且使elF2a磷酸化，這將使ATF的翻譯增加，激活的ATF4將結(jié)合AARE調(diào)控目的基因的表達(dá)。

REPO^TMAARE慢病毒報(bào)告基因主要檢測(cè)細(xì)胞中氨基酸受體的活性、藥物研究以及基因過表達(dá)和RNAi的表型分析等。

pGMLVAARE-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒載體的多克隆位點(diǎn)插入了多個(gè)AARE結(jié)合位點(diǎn)，可以高靈敏度地檢測(cè)AARE的激活水平。采用慢病毒作為報(bào)告基因的優(yōu)點(diǎn)在于它能夠感染多種難感染的細(xì)胞，比如原代細(xì)胞，干細(xì)胞，神經(jīng)元細(xì)胞等。而且慢病毒能夠?qū)⑼庠椿虿迦爰?xì)胞基因組內(nèi)，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

質(zhì)粒圖譜：

質(zhì)粒元件信息：

5'LTR	1-635
PBS （primer binding site）	636-653
Ψ （packaging signal）	685-822
RRE （Rev-response element）	1303-1536
cPPT （central polypurine tract）	2028-2151
AA response element	2191-2228
Luciferase	2294-3946
P_PGK（phosphoglycerate kinase promoter）	3976-4484
Puro^r（puromycin resistance gene）	4505-5104
WPRE（woodchuck posttranscriptional regulatory element）	5118-5709
3'LTR	5912-6548
PUC origin of replication	7691-7018
Amp^r	8832-7836

包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
GM-022034	REPO^TMAARE慢病毒報(bào)告基因	50ul×4管；1×10e7TU/ml
-	說明書	-

使用說明：

AARE報(bào)告基因慢病毒顆粒采用慢病毒轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞。用熒光素酶檢測(cè)試劑盒或雙熒光素酶檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1. 病毒操作時(shí)使用生物安全柜，如使用普通超凈工作臺(tái)操作病毒，請(qǐng)不要打開風(fēng)機(jī)。

2. 病毒操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時(shí)必須特別小心，不要產(chǎn)生氣霧或飛濺。如操作時(shí)超凈臺(tái)有病毒污染，立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養(yǎng)板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細(xì)胞感染情況時(shí)應(yīng)遵從以下步驟：擰緊培養(yǎng)瓶或蓋緊培養(yǎng)板。用70%乙醇清理培養(yǎng)瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗(yàn)臺(tái)前，用70%乙醇清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)。

5. 病毒操作完成后，用肥皂清洗雙手。

保存條件：

-80℃保存。（如保存時(shí)間過長，使用前請(qǐng)重新檢測(cè)病毒滴度）

參考文獻(xiàn)：

[1] Averous J, Bruhat A, Jousse C, Carraro V, Thiel G, Fafournoux P.

Induction of CHOP expression by amino acid limitation requires both ATF4 expression and ATF2 phosphorylation.

J Biol Chem. 2004 Feb 13;279（7）:5288-97. Epub 2003 Dec 1.

[2] Palii SS, Chen H, Kilberg MS.

Transcriptional control of the human sodium-coupled neutral amino acid transporter system A gene by amino acid availability is mediated by an intronic element.

J Biol Chem. 2004 Jan 30;279（5）:3463-71. Epub 2003 Nov 17.

產(chǎn)品價(jià)格：

貨號(hào)	名稱	產(chǎn)地	規(guī)格	報(bào)價(jià)/元
GM-022034	Lentivirus AARE luciferase reporter 慢病毒報(bào)告基因顆粒	Genomeditech	50ul×4管； 1×10e7TU/ml	3200

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