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參考價(jià): | 面議 |
- 11212ES03 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):308更新時(shí)間:2025-02-07 13:52:27
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- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 制藥/生物制藥,綜合 |
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產(chǎn)品簡介
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (UDG plus)是2×Mix預(yù)混合試劑,能夠?qū)崿F(xiàn)在單個(gè)反應(yīng)孔中進(jìn)行多達(dá)四重的熒光定量PCR反應(yīng)。本產(chǎn)品含有基因改造的抗體法熱啟動(dòng)Taq酶,極大地提高了擴(kuò)增靈敏度和特異性。同時(shí),本產(chǎn)品對多重反應(yīng)緩沖體系進(jìn)行了深度優(yōu)化,能夠提高反應(yīng)的擴(kuò)增效率,促進(jìn)低濃度模板的有效擴(kuò)增。本產(chǎn)品可用于基因分型和基因多重定量分析。本產(chǎn)品含有UDG酶,可有效防止氣溶膠污染的風(fēng)險(xiǎn)。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 11212ES03/ 11212ES08 / 11212ES12 / 11212ES13/ 11212ES60/ 11212ES62 |
規(guī)格 | 1 mL /5×1 mL / 12.5 mL /1×12.5 mL /20×5 mL /125 mL |
組分信息
組分編號(hào) | 組分名稱 | 11212ES03 (1 mL) | 11212ES08 (5×1 mL) | 11212ES12 (12.5 mL) | 11212ES13 (1×12.5 mL) | 11212ES60 (20×5 mL) | 11212ES62 (125 mL) |
11212 | 2×TaqMan qPCR Mix | 1 mL | 5×1 mL | 12.5 mL | 1×12.5 mL | 20×5 mL | 125 mL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存,有效期18個(gè)月。
使用說明
反應(yīng)體系******
組分 | 體積(μL) | 終濃度 |
2×TaqMan qPCR Mix | 12.5 | 1× |
Primer Mix (10 μM) | x | 0.1-0.5 μM* |
Probe Mix (10 μM) | x | 50-250 nM** |
Rox reference dye*** | 0.5 | 1× |
模板**** | 1-10 | - |
ddH2O | up to 25***** | - |
*引物濃度:Primer Mix中包含多對引物,通常每條引物終濃度為0.2 μM,也可以根據(jù)情況在0.1-0.5 μM間進(jìn)行調(diào)整。
**探針濃度:Probe Mix中包含多條不同熒光信號(hào)的探針,每條探針的濃度可根據(jù)具體情況在50-250 nM間調(diào)整。
***Rox reference dye:使用在Applied Biosystems 等Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差;本產(chǎn)品不含Rox reference dye。如需,推薦使用貨號(hào)10200ES產(chǎn)品。
****模板稀釋:qPCR靈敏度,建議將模板進(jìn)行稀釋使用。若模板為cDNA原液,則模板體積不超過總體積的1/10。
*****反應(yīng)體系:推薦使用25 μL、30 μL或50 μL,以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
******體系配制:請于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制,并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管;推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。使用前務(wù)必充分混勻,避免劇烈震蕩產(chǎn)生過多氣泡。
參考擴(kuò)增程序
步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
污染消化 | 25℃ | 10 min | 1 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 | 95℃ |
| 45 |
退火/延伸* | 60℃ | 30 sec** |
*退火/延伸:溫度和時(shí)間可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求適當(dāng)調(diào)整。
**熒光信號(hào)采集:請按照儀器使用說明書要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)程序設(shè)置,幾種常見儀器的時(shí)間設(shè)定如下:
20 sec:Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec:Applied Biosystems 7300
32 sec:Applied Biosystems 7500
適用機(jī)型
Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
注意事項(xiàng)
1.關(guān)于操作
1)請于使用前確保產(chǎn)品解凍并混勻,短暫離心收集至管底后,置于冰上備用。
2)為避免樣品間交叉污染和氣溶膠污染,推薦在超凈臺(tái)中進(jìn)行反應(yīng)體系的配制。
3)使用過程中避免產(chǎn)品的反復(fù)凍融。
4)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 實(shí)驗(yàn)方法
1)引物設(shè)計(jì)
a. 引物必須具有特異性。
b. 引物的Tm值必須在58-60°C,而且各組引物的Tm差異應(yīng)控制在1-2°C。
c. 引物的長度一般控制在15-30 bp之間。
2)探針設(shè)計(jì)
a. TaqMan探針的Tm值要比對應(yīng)的引物高約10°C(68-70°C)。
b. TaqMan探針和引物間不能形成二聚體。
Ver.CN20230707