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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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19221ES50MolPure® 細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 19221ES50 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):573更新時(shí)間:2024-09-04 17:26:02

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號(hào) 19221ES50 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
MolPure® 細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒采用MolPure® RNA Column A2和新型的溶液體系,適用于從多種新鮮或凍存的動(dòng)物組織或培養(yǎng)細(xì)胞中高效率的提取高純度、高質(zhì)量的總RNA。
產(chǎn)品介紹

MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit

產(chǎn)品描述


MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit采用MolPure® DNA清除/RNA吸附通用柱技術(shù)和和新型的溶液體系,適用于從多種新鮮或凍存的動(dòng)物組織或培養(yǎng)細(xì)胞中高效率提取高純度、高質(zhì)量的總RNA。提取過(guò)程不需要用到有毒的酚、氯仿、β-巰基乙醇等有機(jī)溶劑,也不需要用到耗時(shí)的異丙醇或乙醇沉淀。操作簡(jiǎn)便,15 min即可完成動(dòng)物組織或細(xì)胞(10-30 mg動(dòng)物組織或 (1-10)×106個(gè)動(dòng)物細(xì)胞)RNA的提取。試劑盒內(nèi)的MolPure® DNA清除/RNA吸附通用柱可輕松過(guò)濾除去基因組DNA和高效吸附RNA。提取的總RNA純度高,可用于RT-PCR、qPCR、分子克隆和RNase保護(hù)分析等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。


產(chǎn)品組分


編號(hào)

組分名稱(chēng)

19221ES08

(5 T)

19221ES50

(50 T)

19221-A

DNA清除/RNA吸附通用柱(MolPure® DNA removing/RNA binding Column A2)

10個(gè)

100個(gè)

19221-B

2 mL收集管 (2 mL Collection Tube A2)

10個(gè)

100個(gè)

19221-C

裂解液LB (LB Buffer A2)

3 mL

30 mL

19221-D

去蛋白液PL (PL Buffer A2)

4 mL

40 mL

19221-E

結(jié)合液BD* (BD Buffer A2*)

1 mL

10 mL

19221-F

漂洗液W* (Wash Buffer A2*)

1.3 mL

13 mL

19221-G

RNase-free H2O

1 mL

5 mL


運(yùn)輸和保存方法


常溫運(yùn)輸。室溫避光保存,有效期24個(gè)月。2-8℃可保存更長(zhǎng)時(shí)間。


注意事項(xiàng)


1. 避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。

2. 注意觀察各溶液是否有析出或渾濁(尤其冬季等室溫為低溫環(huán)境時(shí))37℃溫浴復(fù)溶至溶液澄清,避免影響使用效果。

3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

4. 本產(chǎn)品僅作科研用途!

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備


1. 自備設(shè)備和試劑:臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋或金屬浴,1.5 mL RNase-free離心管,液氮,無(wú)水乙醇等。

2. 本試劑盒可以抑制RNase活性,不需要低溫離心,所有的離心步驟常溫進(jìn)行。

3. 使用前,在結(jié)合液BD*19221-E)瓶中加入標(biāo)簽量的無(wú)水乙醇(5 T/50 T分別加入2.4 mL/24 mL無(wú)水乙醇),充分混勻后使用,并做好標(biāo)記

4. 使用前,在漂洗液W*19221-F瓶中加入標(biāo)簽量的無(wú)水乙醇(5 T/50 T分別加入5.2 mL/52 mL無(wú)水乙醇),充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。


操作方法


一、樣本預(yù)處理

  1. 針對(duì)動(dòng)物組織:新鮮組織(< 20 mg)加入350 μL裂解液LB,用玻璃勻漿器或電動(dòng)勻漿器將組織研磨均勻。若用液氮研磨,需磨成細(xì)粉后再加入對(duì)應(yīng)量的裂解液LB,劇烈震蕩20 s充分混勻。

  2. 針對(duì)貼壁細(xì)胞:不需消化,直接裂解;或離心收集細(xì)胞后,加入350 μL裂解液LB (< 5×106個(gè)細(xì)胞),用移液器反復(fù)吹打混勻(直到看不到細(xì)胞團(tuán)為止)。

  3. 針對(duì)懸浮細(xì)胞:直接離心收集細(xì)胞,加入350 μL裂解液LB (< 5×106個(gè)細(xì)胞),用移液器反復(fù)吹打混勻(直到看不到細(xì)胞團(tuán)為止)。

【注】:組織量20-30 mg加入600 μL裂解液LB

【注】:(5-10)×106個(gè)細(xì)胞加入600 μL裂解液LB

二、RNA提取

1. 將處理好的勻漿液加到DNA清除/RNA吸附通用柱(柱子放在2 mL收集管內(nèi)),13,000 rpm離心1 min,收集含有RNA的濾液。

2. 精確估算濾液體積加入等體積的結(jié)合液BD*(請(qǐng)先確認(rèn)已加入無(wú)水乙醇!)立即輕柔吹打混勻。

3. 將上述混合液全部加入新的DNA清除/RNA吸附通用柱中,13,000 rpm離心30 s,棄掉濾液。

4. 加入700 μL去蛋白液,室溫30 s,13,000 rpm離心30 s棄掉濾液,DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管中。

5. 加入500 µL漂洗液W*(請(qǐng)先確認(rèn)已加入無(wú)水乙醇!),13,000 rpm離心30 s,棄掉濾液。

6. 重復(fù)一遍步驟5,將DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管內(nèi)。

7. 空柱13,000 rpm離心2 min,除去殘留漂洗液W*。

8. 將DNA清除/RNA吸附通用柱放入新的1.5 mL RNase-free離心管中,在中央加入30-50 µL RNase-free H2O,室溫放置1 min,然后13,000 rpm離心1 min,收集濾液,即為RNA溶液。樣品可置于-80℃長(zhǎng)期保存。

【注】:可通過(guò)以下方式提高回收產(chǎn)量:①65℃預(yù)熱RNase-free H2O;②將RNA濾液再次上柱,室溫放置1 min后,洗脫。

HB230110





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