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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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60401ES06動態(tài)濁度法內(nèi)毒素檢測鱟試劑
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 60401ES06 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：1236更新時間：2022-02-11 12:32:24
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- www.yeasen.com
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1.7ML |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 60401ES06 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
Kinetic Turbidimetric LAL Assays
動態(tài)濁度法內(nèi)毒素檢測鱟試劑
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
Kinetic Turbidimetric LAL Assays 動態(tài)濁度法內(nèi)毒素檢測鱟試劑 | 60401ES06 | 1.7 mL | 4℃ | 1486 |
產(chǎn)品描述
鱟試劑為鱟科動物東方鱟的血液變形細胞溶解物的冷凍干燥品，鱟試劑中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。
動態(tài)濁度法內(nèi)毒素檢測鱟試劑（Kinetic Turbidimetric LAL Assays）是通過檢測反應(yīng)混合物的濁度到達某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時間，或是檢測濁度增加速度來檢測內(nèi)毒素的方法。在適宜的條件下（溫度，pH值及無干擾物質(zhì)），細菌內(nèi)毒素激活C因子，引起一系列酶促反應(yīng)，使鱟試劑產(chǎn)生凝集反應(yīng)形成凝膠。隨著凝膠的形成，反應(yīng)液的吸光度(OD值，濁度)增加，OD值增加的速度與內(nèi)毒素濃度成正相關(guān)。換言之，OD值上升某一預(yù)設(shè)限值(啟動OD)所需要的時間(定義為啟動時間)與內(nèi)毒素濃度成負相關(guān)，啟動時間的對數(shù)與內(nèi)毒素濃度的對數(shù)成線性關(guān)系，據(jù)此，可以定量供試品的內(nèi)毒素濃度。
運輸與保存方法
冰袋運輸。4ºC，避光保存，有效期兩年。
注意事項
1）該試劑盒用于體外細菌內(nèi)毒素的定量檢測，嚴禁試劑以任何途徑進入機體。
2）接觸試劑及供試品的所有器皿必須是除熱原的。試驗過程應(yīng)防止微生物的污染。
3）該說明書中的除熱原指內(nèi)毒素濃度小于0.005 EU/ml。
4）供試品的pH 值應(yīng)在6.0-8.0之間，若超出此范圍，需用除熱原的緩沖液、0.1 M氫氧化鈉或0.1M鹽酸調(diào)節(jié)。
5）當供試品中可能存在鱟試驗的干擾物質(zhì)時，須進行干擾試驗，參見【供試品的干擾試驗】。
所需材料和設(shè)備
1. 試劑：內(nèi)毒素工作標準品、鱟試劑、細菌內(nèi)毒素檢查用水。
2. 器材：
除熱原試管、除熱原吸頭、除熱原加樣槽、除熱原96孔微板。
旋渦混合器、移液器、多道移液器、試管架。
帶溫育系統(tǒng)的動態(tài)光度測定儀器及配套軟件，例如，微板鱟試儀ELx808及軟件TALgent 或Gen5。
操作方法
1. 動態(tài)光度測定儀器的設(shè)定，以微板鱟試儀ELx808為例：
預(yù)熱儀器，設(shè)置溫育溫度為37℃。
設(shè)置模板及程序。
設(shè)定讀板波長為340nm、630nm，設(shè)定動力學參數(shù)：讀板90-120分鐘， 每讀板間隔30-150s。
2. 內(nèi)毒素標準溶液配制
1）標準曲線所采用的內(nèi)毒素濃度可以為2至10倍稀釋的系列(如0.5，0.25，0.125，0.0625EU/ml 或10，1，0.1，0.01EU/ml))。
2）取內(nèi)毒素工作標準品1支，用砂輪沿安瓿頸部劃痕，開啟，加入適量（建議在0.5 ml-1.2 ml之間）細菌內(nèi)毒素檢查用水，置旋渦混合器上劇烈振搖5分鐘。
3）將上述內(nèi)毒素溶液進一步用細菌內(nèi)毒素檢查用水稀釋成所需濃度，每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上劇烈振搖1分鐘。
稀釋的內(nèi)毒素溶液靜置時間超過10分鐘，用前在旋渦混合器上劇烈振搖1分鐘，配置時間超過4小時的內(nèi)毒素溶液應(yīng)丟棄。(參見《內(nèi)毒素工作標準品使用說明書》)。
3. 陰性對照為細菌內(nèi)毒素檢查用水。
4. 鱟試劑的溶解：按標示量加細菌內(nèi)毒素檢查用水于鱟試劑中，輕輕振搖使鱟試劑*溶解。注意不要用旋渦混合器劇烈振搖。溶解的鱟試劑應(yīng)在10分鐘內(nèi)使用。
若采用多道移液器，將溶解的鱟試劑轉(zhuǎn)移到除熱原加樣槽，并輕輕搖勻。
5. 實驗操作（微板鱟試儀ELx808）：
1）取除熱原微板，在各孔中分別加入100μl細菌內(nèi)毒素檢查用水、內(nèi)毒素標準溶液，或供試品。
2）將微板放置于鱟試儀中，37℃溫育10分鐘。
3）溫育結(jié)束，用移液器或多道移液器加入100μl 鱟試劑（避免產(chǎn)生氣泡!)，中速振搖10 秒混勻，在340nm波長處，每30秒（到60秒）讀一次，讀板120分鐘。
數(shù)據(jù)處理
設(shè)定啟動OD(可以設(shè)為0.02, 一般可以在0.02到0.04之間)，軟件自動給出其啟動時間(T)。
建立標準曲線：lgT = b lgC + a，其中T為啟動時間，C為內(nèi)毒素的濃度，b為直線斜率，a為Y軸截距。
當實驗數(shù)據(jù)同時滿足如下三個條件時實驗才有效：
① 標準曲線的濃度點≥ 3，標準曲線的相關(guān)系數(shù)r ≤ -0.980，
② 標準曲線低點的T值小于陰性對照的T值，
③ 供試品平行管的平均值在標準曲線的區(qū)間內(nèi)。
【供試品的干擾試驗】
① 當對新藥或無內(nèi)毒素檢查項的品種建立內(nèi)毒素檢查法時，必須進行干擾試驗；
② 當鱟試劑、供試品的來源、配方、生產(chǎn)工藝改變，或試驗環(huán)境中發(fā)生了任何有可能影響試驗結(jié)果的變化時，必須重新進行干擾試驗；
③ 當供試品中可能存在鱟試驗的干擾物質(zhì)時，須進行干擾試驗。
步驟如下：、
1）選擇標準曲線中點或一個靠近中點的內(nèi)毒素濃度（設(shè)為λm），作為供試品干擾試驗中添加的內(nèi)毒素濃度，如采用標準曲線為10，1，0.1，0.01EU/ml 系列時, 可以用供試品配制0.1EU/ml 內(nèi)毒素濃度作為實驗的供試品陽性對照。
2）用供試品溶液配制濃度為λm 的內(nèi)毒素溶液（即含λm 內(nèi)毒素的供試品陽性對照），測量出該溶液的內(nèi)毒素濃度，稱為Cs；
3）測量出未添加外源內(nèi)毒素的供試品溶液內(nèi)毒素濃度，稱為Ct；
4）計算該試驗條件下的回收率R＝（Cs–Ct）/λm × 100%
5）當R在50%～200%之間，則認為在此試驗條件下供試品溶液不存在明顯干擾作用。
6）當R在50%～200%之外，需對供試品進行系列稀釋或進行其它處理消除干擾, 每一稀釋溶液都重復(fù)步驟2-4, 直到內(nèi)毒素的回收率R在50%～200%之間。選擇回收率Rjie近100%的稀釋倍數(shù)進行內(nèi)毒素檢測。
(參見《中華人民共和國藥典》2010版中《細菌內(nèi)毒素檢查法》)
HB191220
