化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：Hoechst 33258染色液（0.1mM）
貨號：FSP173
產(chǎn)品規(guī)格：10 mL/50 mL
分類：熒光核酸試劑
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
?
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時，熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切，使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
NAMALWA（人Burkitt's淋巴瘤細胞）現(xiàn)貨供應(yīng)LRSAM1 (D1O5S) Rabbit mAb100 ul
PK-15（豬腎細胞）現(xiàn)貨供應(yīng)TAF15 (D8V6Q) Rabbit mAb100 ul
RL95-2（人子宮內(nèi)膜癌細胞）報價Oct-4A (C30A3) Rabbit mAb20 ul
CW-2（人結(jié)腸癌細胞）價格Oct-4A (C30A3) Rabbit mAb500 ul
MV3（人黑色素瘤細胞）報價CD45 (HI30) Mouse mAb (PE-Cy7®Conjugate)100 ul
PA319（人大腸癌細胞）價格Phospho-C/EBPα (Ser21) Antibody20 ul
SF-295（人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞）報價Phospho-C/EBPα (Ser21) Antibody100 ul
MS751（人子宮頸表皮癌細胞）說明書Phospho-HER3/ErbB3 (Tyr1289) (D1B5) Rabbit mAb100 ul
人小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基報價cdc2 (E1Z6R) Rabbit mAb100 ul
人直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基價格C/EBPalpha (p42) Antibody100 ul
人輸尿管上皮細胞*培養(yǎng)基報價Phospho-C/EBPα (Thr222/226) Antibody20 ul
人主動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基報價Phospho-C/EBPα (Thr222/226) Antibody100 ul
人腦靜脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基說明書4E-BP2 Antibody20 ul
人腦膜細胞*培養(yǎng)基價格4E-BP2 Antibody100 ul
人晶狀體上皮細胞*培養(yǎng)基價格Phospho-4E-BP1 (Thr37/46) (236B4) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul
大鼠腸上皮細胞*培養(yǎng)基報價ZO-2 Antibody20 ul
大鼠膀胱平滑肌細胞*培養(yǎng)基價格ZO-2 Antibody100 ul
Hoechst 33258染色液（0.1mM）問號狀鉤端螺旋體種屬: Leptospira│interrogans凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分型 Pyrogenes biggis培養(yǎng)基: CM0114生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Marinobacter│hydrocarbonoclasticus分離基物: 沉積物凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 海洋菌種資源培養(yǎng)基: 0223生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rhizopus│sp.凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│firmus Bredemann and Werner分離基物: 根內(nèi)斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 141生長條件: 28存儲條件: 定期移植法
Aspergillus│awamori凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Penicillium│aurantiogriseum凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Haemophilus│parasuis分離基物: 心血凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研教學(xué)培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Staphylococcus│aureus分離基物: 病料凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
Clostridium│perfringens Type D分離基物: 腸毒血癥羊凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研及血清定型培養(yǎng)基: 52生長條件: 35-37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本（100mg組織或107個細胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計合成（費用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告，包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
化工儀器網(wǎng)