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詳細介紹
產(chǎn)品分類：細胞染色
儲存條件：室溫,避光,12個月
用途：用于精子形態(tài)分析,評估畸形率
注意事項：本染色方法系WHO推薦Diff-Quik染色法,因精子及細胞內(nèi)不同等電點的蛋白質(zhì)在相同的酸度下帶不同的電荷,能選擇性地結(jié)合相應的染料而著色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
精子形態(tài)學快速染色液 | 3×20ml | FS-R6686 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
糯稻根（標準品） Chlortoluron solutionG蛋白偶聯(lián)受體115抗體包裝1g
歐當歸內(nèi)酯A（標準品） DiuronG蛋白偶聯(lián)受體10抗體包裝5g
歐夾竹桃苷（標準品） Clofentezineβ-葡萄糖腦苷脂抗體包裝1g
歐前胡（標準品） Fenuron半乳糖凝集相關(guān)蛋白A抗體包裝250mg
藕節(jié)（標準品） Daminozide半乳糖凝集12抗體包裝5g
盤龍參（標準品） DEETγ基丁運載蛋白3抗體包裝100g
螃蟹（標準品） TerbumetonGTPIMAP家族成員1抗體包裝25g
胖大海（標準品） ThifluzamideGTPIMAP家族成員2抗體包裝5g
佩蘭（標準品） TsumacideGTPIMAP家族成員3抗體包裝1g
蟛蜞菊內(nèi)脂;蟛蜞菊內(nèi)酯(標準品) TerbuthylazineGTPIMAP家族成員4抗體包裝5g
披麻草（標準品） Tri-tert-butylphosphineGTPIMAP家族成員5抗體包裝25g
枇杷葉（標準品） TebufenpyradG蛋白調(diào)節(jié)誘導神經(jīng)突增生蛋白2抗體包裝5g
片姜黃（標準品） 1-NaphthaleneacetamideGTPIMAP家族成員7抗體包裝1g
平貝母（標準品） ThiaclopridGTPIMAP家族成員8抗體包裝25g
坡模-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯 Tricyclazol solutionG蛋白調(diào)節(jié)誘導神經(jīng)突增生蛋白1抗體包裝5g
細腳擬青霉Paecilomyces tenuipes 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品牛小腸堿性磷試劑盒沒食子酯;Propyl gallat
白靈菇Pleurotus│nebrodensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%牛奶過敏原特異性IgE抗體芒果苷;Mangiferin
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)牛兒基焦磷合試劑盒沒食子;Gallic acid
精子形態(tài)學快速染色液Mtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原規(guī)格： 0.5mg
WIG-1(wtp53-induced gene 1) 野生型p53誘導基因1抗原規(guī)格： 0.5mg
P73 protein P73腫瘤抑制基因抗原規(guī)格： 0.5mg
p70 S6 Kinase/P70 Beta1 p70S6Kb抗原規(guī)格： 0.5mg
PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 癌易感基因相關(guān)蛋白2規(guī)格： 0.5mg
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