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詳細(xì)介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS632124 |
商品介紹：
測定意義 細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的積累是脂質(zhì)合成與分解失衡的結(jié)果。脂肪酸合成增多，而氧化分解降低，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積累。FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶，催化乙酰fu酶A和丙二酰fu酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達(dá)于各種組織細(xì)胞中，在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達(dá)豐富。 測定原理 以NADPH為還原力，F(xiàn)AS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長鏈脂肪酸；通過測定NADPH的減少量，即可推算出FAS活性。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器和用品 研缽、冰、臺式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)英文名：FGF4 ELISA Kit艾滋病病制約錨定蛋白抗體包裝5g
成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF-13)英文名：FGF-13 ELISA Kit腺苷環(huán)化1抗體包裝1g
成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)英文名：FGF10 ELISA Kit核糖核L抑制蛋白抗體包裝5g
超氧化物歧化(SOD)英文名：SOD ELISA KitRho GTP激活蛋白24抗體包裝25g
超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)英文名：hs-CRP ELISA KitGTP激活蛋白ASAP3抗體包裝5g
腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)英文名：iFABP ELISA Kit激活受體1C抗體包裝25g
叉頭框蛋白03(FoxP3)英文名：FoxP3 ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血13型抗體包裝1g
層連蛋白/板層(LN)英文名：LN ELISA Kit去整合樣金屬蛋白11抗體包裝25g
草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移(PAT)英文名：PAT ELISA Kit去整合樣金屬蛋白12抗體包裝5g
不對稱二基精(ADMA)英文名：ADMA ELISA Kit去整合樣金屬蛋白15抗體包裝1g
補(bǔ)體因子H(CFH)英文名：CFH ELISA Kit去整合樣金屬蛋白2抗體包裝25g
補(bǔ)體片斷5a(C5a)英文名：C5a ELISA Kit載脂蛋白E2受體抗體包裝5g
補(bǔ)體片斷3a(C3a)英文名：C3a ELISA Kit腺苷A1受體抗體包裝100g
補(bǔ)體蛋白5(C5)英文名：C5 ELISA Kit通道蛋白0抗體包裝1g
補(bǔ)體蛋白4(C4)英文名：C4 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體包裝25g
淀粉樣肽前體蛋白抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)Isoindigotin is used in the therapy of Y.
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒50管/48樣谷棒桿 5-溴-3-氟-2(1H)-吡啶酮甲胎蛋白異質(zhì)體3Elisa
紅緣層孔 2,5-二溴-3-氟吡啶甲肟前列腺D2Elisa
異配囊接霉 3-溴-2-氟甲狀旁腺Elisa
達(dá)里湖芽孢桿 4-芐氧基-3,5-二氟苯酸甲狀腺抗體;甲狀腺激球蛋白Elisa
蒂蓋姆頭珠霉 乙酰酮鈰水合物甲狀腺激阻斷抗體Elisa
相思根瘤 2,3-二氟-4-丁氧基苯酸甲狀腺過氧化物Elisa
那波鏈霉 5-溴-7-甲基-1H-吲唑甲狀腺結(jié)合球蛋白Elisa
谷棒桿 甲狀腺鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體Elisa
平菇 6-羧基六熒光甲狀腺球蛋白Elisa
羅爾細(xì)薄 6-羧基四熒光甲狀腺受體相互作用蛋白6Elisa
根腐平臍蠕孢 4-(三氟甲基)鹽酸鹽甲狀腺Elisa
布氏乳桿 2,6-二氟吡啶-3-甲間變性瘤激Elisa
psilent-dual1(pSD1) 5,10-二氫-5,10-二甲基吩間皮Elisa
哈氏弧 三聚聚磷酸鹽堿性成纖維生長因子Elisa
銅綠假單胞(綠膿桿)* 對異丁堿性成纖維生長因子9Elisa
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