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MOPS電泳緩沖粉劑

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更新時間:2022-08-30 09:22:52瀏覽次數(shù):371

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1L
貨號 FS-R7301 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7301
MOPS電泳緩沖粉劑公司正在銷售的產(chǎn)品:Anti-OR5AU1 Antibody人凋亡相關(guān)因子配體
Anti-OR5AU1 Antibody大鼠胰蛋白酶原激活肽
Anti-OR5B12 Antibody大鼠補體因子H
Anti-OR5B3 Antibody人凋亡相關(guān)因子
Anti-OR5F1 Antibody小鼠CD8分子
Anti-OR5H1 Antibody人E選擇素
Anti-OR5D13

詳細介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

MOPS電泳緩沖粉劑

1L

FS-R7301

產(chǎn)品分類:核酸電泳

儲存條件:室溫,24個月

用途:主要用于RNA電泳

注意事項:主要由MOPS、乙酸鈉、EDTA組成,溶解于DEPC水中。

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

孤島鹽單胞菌二甲基化組蛋白H3K4抗體Human SCN4B ELISA Kit類人猿

海南小短桿菌二甲基化組蛋白H3K9抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit類人猿免疫球蛋白G4(IgG4)免疫試劑盒

梾木生殼針孢基化組蛋白H3抗體Human SEC23IP ELISA Kit類人猿巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒

植物乳桿菌植物亞種乙?;M蛋白H3抗體Human VTCN1(V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1) ELISA Kit類人猿降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌乙?;M蛋白H3抗體Human SEC24C ELISA Kit類人猿降鈣(CT)免疫試劑盒

燼灰紅鏈霉菌果糖發(fā)酵亞種磷化肝核因子4α抗體Human SEC24A ELISA Kit類人猿黃體生成(LH)免疫試劑盒

賴芽胞桿菌屬高遷移率核小體結(jié)合蛋白1Human SEC31A ELISA Kit類人猿骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒

根瘤菌磷化組蛋白H3抗體Human SDR39U1 ELISA Kit蝌蚪

木蹄層孔菌組織相容性復合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit蝌蚪睪(T)免疫試劑盒

黑木耳肝生長因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kit蝌蚪雌二(E2)免疫試劑盒

植物乳桿菌HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA Kit蝌蚪γ基丁(GABA)免疫試劑盒

蟲類神食酵母瘤病調(diào)控因子1抗體(鋅指蛋白395)Human SDCCAG8 ELISA Kit鯨

桔橙小單孢菌人類狀瘤病18 E6單克抗體Human SCN4B ELISA Kit鯨孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

白鵝膏菌(不可訂購)異質(zhì)核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit鯨狀腺原(T3)免疫試劑盒

沃氏富鹽菌異質(zhì)核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit鯨皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

相思根瘤菌異質(zhì)核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit鯨甲狀腺(T4)免疫試劑盒

: N144資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:1.0 M in toluene常春藤皂苷元

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品D-松

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
MOPS電泳緩沖粉劑CTGF ELISA Kit  大鼠結(jié)締組織生長因子規(guī)格: 48T

AsAb ELISA Kit  大鼠抗規(guī)格: 48T

PTH ELISA Kit   大鼠jia狀旁腺激su規(guī)格: 48T

HIS ELISA Kit  大鼠組an規(guī)格: 48T

IL-13 ELISA KIT  大鼠白介su13規(guī)格: 48T

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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