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詳細介紹
產(chǎn)品分類：核酸雜交
儲存條件：4℃,避光,6個月
用途：用于RNA的含甲酰胺的雜交緩沖液，溶解RNA，并保護RNA
注意事項：由PIPES、EDTA、氯化鈉、去離子甲酰胺等組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
RNA雜交緩沖液 | 100ml | FS-R7407 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
假單胞菌NK受體2C抗體Human LAPTM4B(Lysosomal-associated transmembrane protein 4B) ELISA Kit人抗卵巢抗體(AOAb)
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紫芝神經(jīng)元3抗體Human SERPINB4(Serpin B4) ELISA Kit人抗類固生成抗體(SCA)
孢小殼銀漢霉NFkB誘導激抗體Human UCN3(Urocortin-3) ELISA Kit人抗類風濕關節(jié)炎核抗原抗體(RANA)
Aeromicrobium marinum核因子p50/k基因結合核因子抗體Human MYH1(Myosin-1) ELISA Kit人抗類風濕關節(jié)炎核抗原(RANA)
硬結節(jié)桿菌神經(jīng)激肽A受體/K物質受體抗體Human UBB(Polyubiquitin-B) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)
白環(huán)柄菇神經(jīng)激肽B抗體Human FGFR1(Fibroblast growth factor receptor 1) ELISA Kit人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)
產(chǎn)黃青霉神經(jīng)粘蛋白抗體Human BCAM(Basal cell adhesion molecule) ELISA Kit人抗菌肽(CAMP)
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型神經(jīng)束蛋白抗體Human GLUL(Glutamine synthetase) ELISA Kit人抗菌肽(Attacin)
綠色木霉Trichoderma│viride 質量規(guī)格：>500U/MG,BR硫基葡萄糖
葡萄球菌Staphylococcus│sp. 質量規(guī)格：>98%,BR硫辛
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格：0.97硫軟骨
RNA雜交緩沖液MPO(Mouse myeloperoxidase) ELISA Kit 小鼠髓過氧化物mei規(guī)格： 48T
Gzms-B(Mouse granzymes B) ELISA Kit 小鼠顆粒meiB規(guī)格： 48T
VEGFR-1/Flt1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA Kit 小鼠血管內皮細胞生長因子受體1規(guī)格： 48T
Gzms-A(Mouse granzymes A) ELISA Kit 小鼠顆粒meiA規(guī)格： 48T
Lptn/LTN/XCL1(Mouse lymphotactin) ELISA Kit 小鼠淋巴細胞趨化因子規(guī)格： 48T
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