公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。 測(cè)定原理: PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在525nm有特征光吸收。 需自備的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
墨蝶呤還原(SPR)英文名:SPR ELISA Kit癌胚抗原單克抗體(包被)包裝1g
末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)英文名:C5b-9 ELISA Kit癌胚抗原單克抗體(檢測(cè))包裝5g
膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)英文名:FPN ELISA Kit癌基因c-Raf抗體包裝1g
膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)英文名:ANXA5 ELISA KitⅢ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體包裝5g
膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)英文名:ANXA2 ELISA Kit黑色瘤相關(guān)抗原抗體包裝1g
膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)英文名:ANXA1 ELISA KitCD33抗體包裝25g
免疫球蛋白樣EGF樣域酪激1(Tie1)英文名:Tie1 ELISA Kit睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α抗體包裝5g
免疫球蛋白G3(IgG3)英文名:IgG3 ELISA KitCD7抗體包裝100g
免疫球蛋白G2α(IgG2α)英文名:IgG2α ELISA Kit尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體包裝1g
密封蛋白(OCLN)英文名:OCLN ELISA KitCD68抗體包裝25g
錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)英文名:ANKRD1 ELISA Kit緊密連接蛋白1抗體包裝5g
絡(luò)絲蛋白(RL)英文名:RL ELISA Kit膜輔蛋白抗體包裝25g
卵泡抑樣蛋白3(FSTL3)英文名:FSTL3 ELISA KitCXC趨化因子16抗體包裝5g
膽固脂酰轉(zhuǎn)移(LCAT)英文名:LCAT ELISA Kit色c氧化IV亞型1抗體包裝1g
卵白蛋白(OVA)英文名:OVA ELISA Kit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框227抗體包裝250mg
葡萄汁有孢漢遜酵母Hanseniaspora│uvarum 質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%中性粒趨化蛋白2試劑盒棕櫚乙酯;Palmitic acid
梨形卷枝霉Helicostylum│piriforme 質(zhì)量規(guī)格:>99%,光學(xué)純度>98%,標(biāo)準(zhǔn)品中性粒顆??贵w試劑盒紫蘇;l-Perillaldehyde
ATCC19262=CECT579=CIP104721=CIP63.28=IAM資源名稱(chēng): 大西洋假交替單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,(Src/Abl)酪激雙重抑制劑中性??贵w試劑盒紫蘇葶;Perillartine
多酚氧化酶(PPO)測(cè)試盒50管/24樣匍枝根霉原變種 2-硝基-4,5-二氟甲苯抑制性IgG受體Elisa
白僵 4-苯磺酰2,3-雙加氧Elisa
香菇—五香1號(hào) 4-(甲磺酰基)芐鹽酸鹽2,3-雙加氧1Elisa
釀酒酵母 4-苯砜隱熱蛋白Elisa
猴假單胞 4-叔丁基環(huán)已酮印度猬因子Elisa
奇異球 4-叔丁基環(huán)己(順?lè)椿旌?應(yīng)答元件結(jié)合蛋白1Elisa
盤(pán)孢 5-(2-)異惡唑-3-甲酸硬骨Elisa
釀酒酵母 鄰氨基苯甲-4-磺酸游離β絨毛膜促性腺Elisa
鍺栓孔 2-氨苯-5-磺酸游離膽固Elisa
芽胞桿 5-(2-溴乙基)-2,3-二氫苯并游離蛋白SElisa
中國(guó)臺(tái)灣根霉 苯甲?;F游離睪酮Elisa
蘋(píng)果落葉交鏈孢霉 2-氨基-4-磺?;坞x甲狀腺Elisa
假單胞屬 N,N-二甲基二茂鐵游離前列腺特異性抗原Elisa
硬結(jié)節(jié)桿 乙烯基二茂鐵游離狀腺原Elisa
根瘤 3,4-二代苯磺酰游離血紅蛋白Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。