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SOC固體培養(yǎng)基粉劑

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更新時(shí)間:2022-07-04 12:40:09瀏覽次數(shù):298

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1L
貨號(hào) FS-R6415 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R6415
SOC固體培養(yǎng)基粉劑公司正在銷售的產(chǎn)品:兔核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)試劑盒Anti-CD47 Antibody原鈣粘蛋白γB5抗體
兔酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)試劑盒Anti-CD5 Antibody蛋白酶體PSMα5抗體
兔VII型膠原(COL7)試劑盒 Anti-CD5 Antibody含patatin樣磷脂酶6抗體
兔白活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 Anti-CD47 Ant

詳細(xì)介紹

63.jpg
產(chǎn)品分類:培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  4℃,12個(gè)月

用途  轉(zhuǎn)化的熱激處理后恢復(fù)培養(yǎng)

注意事項(xiàng)  主要由高濃度胰蛋白胨、酵母提取物、低濃度氯化鈉、葡萄糖、瓊脂等組成。粉劑溶解于水后,如要求無菌,應(yīng)過濾除菌。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

SOC固體培養(yǎng)基粉劑

1L

FS-R6415

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

纖維蛋白原α(FGα)FGα ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框65抗體包裝0.5mg

纖維蛋白原(FG)FG ELISA Kit基轉(zhuǎn)移cyt-19抗體包裝1g

纖溶抑制因子(TAFI)TAFI ELISA Kit單核趨化蛋白4抗體包裝25g

纖溶原激活物抑制因子2(PAI2)PAI2 ELISA KitCD34抗體包裝5g

纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)PAI1 ELISA Kit白共同抗原抗體包裝1g

夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)CLC ELISA Kit磷化反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5g

細(xì)胞周期D3(CCND3)CCND3 ELISA Kit間隙連接蛋白37抗體包裝1g

細(xì)胞周期D2(CCND2)CCND2 ELISA Kit2型補(bǔ)體受體抗體包裝5g

細(xì)胞周期D1(CCND1)CCND1 ELISA Kit唾液轉(zhuǎn)移1/α-2,6唾液轉(zhuǎn)移抗體包裝1g

細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)SOCS3 ELISA Kit碳酐9抗體包裝5g

細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激2(ERK2)ERK2 ELISA Kit色P450 17抗體包裝100g

細(xì)胞外基質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)MEPE ELISA Kit色P450 7A1抗體/膽固7a羥化包裝25g

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1(ECM1)ECM1 ELISA Kit膽固24羥化抗體包裝500g

P450家族成員7A1(CYP7A1)CYP7A1 ELISA Kit腫瘤新因子1抗體包裝5g

P450家族成員3A4(CYP3A4)CYP3A4 ELISA Kit膽固25α7羥化抗體包裝1g

球形節(jié)桿菌Arthrobacter│globiformis 質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%組織蛋白去乙?;噭┖锌?fàn)钕偾虻鞍卓贵w

黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白S試劑盒乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)國(guó)家參

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR組織蛋白L1試劑盒腸道病71型IgM抗體國(guó)家參考品
SOC固體培養(yǎng)基粉劑GAPDH(human)/FITC  熒光標(biāo)記3-甘油脫氫(人)IgG2-酰吡 ≥99%,FG,FCC

GAPDH(rat、mouse)/FITC  熒光標(biāo)記3-甘油脫氫(大鼠、小鼠)IgG對(duì)氧芐酯 98%

GAPDH/FITC  熒光標(biāo)記3-甘油脫氫IgG對(duì)氧芐酯 97%,FCC

GAPDH/FITC  熒光標(biāo)記3-甘油脫氫IgG3-酰氧-2-丁酮 98%

Gastrin/FITC  熒光標(biāo)記胃泌/蛙皮IgG4-酰氧-2, 5-二 -3-呋喃酮 98%

Gastrin/FITC  熒光標(biāo)記胃泌/蛙皮IgG黑胡椒油 食品級(jí)

Brs3/Bombesin Receptor 3/FITC  熒光標(biāo)記蛙皮受體3IgG布枯油 natural, FG

GATA-3/FITC  熒光標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白3IgG桂油 FCC


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