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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類：細(xì)胞培養(yǎng)
儲存條件 室溫,12個月
用途 去離子水,用于細(xì)胞培養(yǎng)
注意事項(xiàng) 無菌,經(jīng)高壓滅菌處理。pH值為7.3。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
無菌去離子水 | 100ml | FS-R6380 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)IL-1sRⅡ ELISA Kit炭疽桿菌抗體包裝1g
白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)IL-1sRⅠ ELISA Kit腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體包裝1g
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白介1β(IL－1β)IL－1β ELISA KitABI1/SSH3BP1蛋白抗體包裝25g
白介1β(IL-1β)IL-1β ELISA Kit乙酰化組蛋白H1b抗體包裝5g
白介1α(IL－1α)IL－1α ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝1g
白介1α(IL-1α)IL-1α ELISA Kit多功能DNA修復(fù)抗體包裝5g
白介18結(jié)合蛋白(IL-18BP)IL-18BP ELISA KitAP2關(guān)聯(lián)激1抗體包裝1g
白介18(IL－18)IL－18 ELISA Kit通道蛋白1抗體包裝200mg
白介18(IL-18)IL-18 ELISA KitAATK凋亡關(guān)聯(lián)酪激抗體包裝100mg
白介17A(IL－17A)IL－17A ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族5抗體包裝25g
白介17(IL－17)IL－17 ELISA KitN-基DNA糖基化包裝5g
白介16(IL-16)IL-16 ELISA KitAU5 tag標(biāo)簽抗體包裝1g
白介15(IL-15)IL-15 ELISA Kit鈣離子ATP通道蛋白抗體包裝5g
白介13(IL－13)IL－13 ELISA Kit果桃α-L-阿伯糖苷抗體包裝1g
磷化促腎上腺皮質(zhì)激ACTH抗體基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)ELR510444是新型微管阻斷劑，抑制MDA-MB-231增殖的IC50值為30.9nM，P-gp底物分子。
無菌去離子水DLK1/FITC 熒光標(biāo)記穿膜蛋白DLK1IgG羥纖維 1500～2500mpa.s，25℃
DLX4/FITC 熒光標(biāo)記兔抗DLX4IgG羥纖維 2600～3300mpa.s，25℃
DMBT1 /FITC 熒光標(biāo)記抑癌因IgG羥纖維 5000～6400mpa.s，25℃
DMT1/FITC 熒光標(biāo)記金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1IgG四溴化碳 98%
Dnmt1/FITC 熒光標(biāo)記DNA轉(zhuǎn)移1IgG四溴化碳 99%
Dnmt3a/FITC 熒光標(biāo)記DNA轉(zhuǎn)移-3αIgG銀 99.9%，≤0.1μm
Dnmt3 Beta/FITC 熒光標(biāo)記DNA轉(zhuǎn)移-3βIgG銀 99.95%，1.0μm
DNA-PKcs/FITC 熒光標(biāo)記DNA依賴蛋白激催化亞IgG銀 99.9%,≤0.5μm
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