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丙酮酸脫羧酶提取試劑

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更新時(shí)間:2022-07-05 09:43:32瀏覽次數(shù):246

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號(hào) FS-R6560 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R6560
丙酮酸脫羧酶提取試劑公司正在銷售的產(chǎn)品:兔促生長(zhǎng)(GH)試劑盒Anti-HCN2 Antibody凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)素抗體
兔平足蛋白(PDPN)試劑盒Anti-HCVAg Antibody腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體
兔甲基化酶(Methylase)試劑盒Anti-HDAC10 Antibody腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體
兔纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 Anti-HDAC11 A

詳細(xì)介紹

63.jpg
產(chǎn)品分類:細(xì)胞組分分離

儲(chǔ)存條件:—20℃,避光,12個(gè)月

用途:主要用于裂解植物組織,提取樣品中的丙酮酸脫羧酶(PDC)

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

丙酮酸脫羧酶提取試劑

500ml

FS-R6560

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

諾沙星鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Prasugrel腫瘤壞死因子配體超家族成員10C包裝250mg

Clonidine hydrochloride 干擾誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體包裝5g

帕米磷二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Clonidine hydrochloride 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體包裝100g

帕米膦二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Methoxyestradiol穿膜蛋白DLK1抗體包裝1g

帕潘立(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-MethoxyestradiolDysferlin蛋白抗體包裝25g

哌西林(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Methoxyestradiol防御β2/Defensin β2抗體包裝5g

哌西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenformin hydrochloride死亡相關(guān)蛋白5抗體包裝1mg

哌(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenformin hydrochloride解旋DEAD5抗體包裝25g

派可林(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefoperazone sodium間粘附分子整合蛋白3抗體包裝100g

泮托唑鈉1.5合物(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefoperazone sodiumCaspase 激活的脫氧核糖核抗體包裝500g

泮托唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Benzylglycine死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g

培哚普叔丁鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Zanamivir死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝100ml

培哚普雜質(zhì)S9780(培哚普)(標(biāo)準(zhǔn)品) ZanamivirDNA聚合β抗體包裝500ml

培曲塞二鈉D-異構(gòu)體(標(biāo)準(zhǔn)品) Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine死亡相關(guān)蛋白6/Fas死亡區(qū)相關(guān)蛋白抗體包裝1g

培曲塞二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Methazolamide動(dòng)力蛋白2抗體包裝5g

卵孢霉屬Oospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品硒結(jié)合蛋白1試劑盒山茱萸新苷 ;Cornuside

土芽孢桿菌Bacillus│humi 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR硒蛋白P試劑盒棗仁皂苷B1;Jujuboside B

ATCC6538資源名稱:  質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品戊型肝炎病抗體試劑盒棗仁皂苷D;Jujuboside D;
丙酮酸脫羧酶提取試劑Phospho-FAK (Tyr861) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激IgG

Phospho-FAK (Tyr576/577) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激IgG

Phospho-FAK (Tyr925) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激IgG

Phospho-FAK (Tyr407) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激IgG

ER- Alpha(phospho-Tyr537)/FITC  熒光標(biāo)記抗大、小鼠化雌激受體αIgG

Phospho-Progesterone Receptor (Ser190)/FITC  熒光標(biāo)記化孕激受體IgG

phospho-ERK1(pThr202/pTyr204)/FITC  熒光標(biāo)記抗化絲裂原活化蛋白激1IgG

phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC  熒光標(biāo)記抗人、大、小鼠化絲裂原活化蛋白激1/2IgG


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