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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類：DNA溶液
儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月
用途：質(zhì)粒制備溶液
注意事項(xiàng)：主要由Tris、氯化鈉、EDTA、Triton X-100組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
STET裂解液 | 100ml | FS-R7336 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
雅致小克銀漢霉基末端激3抗體Human PRTFDC1 ELISA Kit胰島受體β(ISR-β)
黃柄曲霉磷化活化蛋白激B抗體Human PRRT1 ELISA Kit胰島受體α(INSRA)
棲土曲霉JmjC結(jié)構(gòu)域組蛋白去甲基化H3-K36抗體Human PSMA1 ELISA Kit胰島生長(zhǎng)因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)
黑化鏈霉菌組蛋白去甲基化JARID2抗體Human PRPF8 ELISA Kit胰島生長(zhǎng)因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)
環(huán)帶毛霉JAK和微管相互作用蛋白2抗體（JAK和微管相互作用蛋白2）Human PRUNE ELISA Kit胰島抗體(Anti-Ins)
麥芽糖假絲酵母活化蛋白激B抗體Human PRPH2 ELISA Kit胰島降解(IDE)
分枝枝頂孢磷化蛋白酪激JAK-2抗體Human PRPSAP2 ELISA Kit胰島(INS)
芽孢桿菌凋亡清除受體抗體Human PRPS1L1 ELISA Kit胰島淀粉樣多肽(IAPP)
彎孢菌磷化原癌基因c-Jun抗體Human PRPS1 ELISA Kit原激活肽(TAP)
副豬嗜血桿菌Notch配體Jagged 2蛋白抗體Human PRR13 ELISA Kit原Ⅱ(Try-Ⅱ)
雪腐鐮孢組蛋白去甲基化Jarid1C抗體Human C13orf33(Uncharacterized protein C13orf33) ELISA Kit(trypsin)
香港科恩氏菌組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移JMJD1B抗體Human PRUNE ELISA Kit衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)
可可鏈霉菌可可亞種親聯(lián)蛋白2抗體Human PRPF8 ELISA Kit一氧化碳血紅蛋白(HbCO)
地衣芽胞桿菌驅(qū)動(dòng)蛋白家族蛋白13B抗體Human PRPH2 ELISA Kit一氧化化氮(NO)
蘇云金芽胞桿菌日本亞種驅(qū)動(dòng)蛋白家族蛋白7抗體Human PRMT6 ELISA Kit一氧化氮合(NOS)
地生翅孢殼CREB結(jié)合蛋白抗體Human PRMT8 ELISA Kit一氧化氮合成(NOS)
芒弗里亞擬盤多毛孢Pestalotiopsis│mangifolia 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)(T)馬錢苷
光神農(nóng)球菌Agrococcus│baldri 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)蝙蝠葛堿
新月彎孢Curvularia│lunata 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記濱蒿內(nèi)酯
STET裂解液IGF-1 ELISA Kit 大鼠胰島su樣生長(zhǎng)因子1規(guī)格： 48T
IFN- Gamma ELISA Kit 大鼠γ干擾su規(guī)格： 48T
ICAM-1/CD54 ELISA KIT 大鼠細(xì)胞間粘附分子1規(guī)格： 48T
GM-CSF ELISA Kit 大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子規(guī)格： 48T
GDNF ELISA Kit 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子規(guī)格： 48T
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