DiSC2（3）實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格	貨號(hào)
DiSC2(3)	25 mg	FSP204

產(chǎn)品特點(diǎn):
靈敏度高：產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號(hào)強(qiáng)
?
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
?
使用方法：
注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
人CD63分子（CD63）分析檢測(cè)試劑盒eIF6 Antibody100 ul

人CD117分子（CD117）分析檢測(cè)試劑盒Ero1-Lα Antibody20 ul

人8異前列腺素F2α（8-iso-PGF2a）分析檢測(cè)試劑盒Ero1-Lα Antibody100 ul

人5羥色/血清素/血清（5HT/ST）抗體（IgM）分析檢測(cè)試劑盒VCAM-1 (D2T4N) Rabbit mAb (Mouse Specific)100 ul

牛葉酸（FA）分析檢測(cè)試劑盒EGF Receptor (V279) Antibody100 ul

牛纖連蛋白（FN）分析檢測(cè)試劑盒ROS1 (69D6) Mouse mAb100 ul

大鼠降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）分析檢測(cè)試劑盒Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠甲羥戊酸5-焦磷酸脫羧酶（MDD）分析檢測(cè)試劑盒Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠活化凝血因子X（FXa）分析檢測(cè)試劑盒Notch1 (C44H11) Rabbit mAb100 ul

大鼠甘膽酸（CG）分析檢測(cè)試劑盒Axl (L283) Antibody100 ul

大鼠鈣衛(wèi)蛋白（CALP）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-c-Jun (Ser73) (D47G9) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物（LDL-IC）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-c-Jun (Ser73) (D47G9) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠α干擾素（IFN-α）分析檢測(cè)試劑盒TNIK Antibody100 ul

大鼠Smad7 分析檢測(cè)試劑盒CD13/APN (D6V1W) Rabbit mAb100 ul

大鼠KiSS-1受體（KISS1R）分析檢測(cè)試劑盒JARID1B Antibody20 ul

大鼠CD44分子（CD44）分析檢測(cè)試劑盒JARID1B Antibody100 ul

大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α（NFKBIA）分析檢測(cè)試劑盒GβL (86B8) Rabbit mAb20 ul
DiSC2(3)螺旋鏈霉菌種屬: Streptomyces│spiralis分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain.培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Rhizopus│sp.凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Penicillium│sp.分離基物: 枯枝枯葉凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生真菌毒素培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 26C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

擬諾卡氏菌種屬: Nocardiopsis│sp.凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類(lèi)學(xué)及嗜鹽微生物其它方面的研究培養(yǎng)基: 38生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 利用甜菜糖蜜、酒精發(fā)酵用酵母。培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Rhizopus│chinensis斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃

Halomonas│venusta分離基物: 沉積物/TVG硫化物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物轉(zhuǎn)化微生物/硫氧化微生物培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Bacillus│thuringiensis斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于抗蟲(chóng)基因的分離和抗蟲(chóng)相關(guān)基礎(chǔ)研究。培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

Dietzia│aerolata分離基物: 沉積物/表層沉積物凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的無(wú)機(jī)污染物抗性菌/分離自Cr富集菌群培養(yǎng)基: 1001生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線(xiàn)性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線(xiàn)性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。