核酮糖1,5-二磷酸羧化酶提取試劑公司正在銷售的產品：兔甘露糖受體(MR)試劑盒 Anti-Gsta3 Antibody羥化酶抗體
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公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：細胞組分分離

儲存條件：4℃,6個月

用途：主要用于裂解植物組織，提取樣品中的核酮糖1,5-二磷酸羧化酶

注意事項：一種酶(EC 4.1.1.39)，分子量約為53kD，由8個大亞基和8個小亞基組成，是光合作用中決定碳同化速率的關鍵酶，該酶活力的大小反應了植物光合能力的強弱，RUBP羧化酶是光合作用碳代謝中的重要的調節(jié)酶，主要存在于葉綠體的可溶部分，總量占葉綠體可溶蛋白50-60%。在植物葉片發(fā)育過程中，此酶活性呈規(guī)律性的變化，在植物衰老或遭受環(huán)境脅迫時，酶活性呈下降趨勢。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

他環(huán),烯土霉(標準品) Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g

托宗(標準品) Amlodipine白免疫球蛋白樣受體-B抗體包裝500g

雄諾龍（標準品） NizatidineCD33L抗體包裝100g

門冬胰島（標準品） Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g

（標準品） Fludarabine軸突生長因子CD108抗體包裝5g

(標準品) Fludarabine唾液結合性免疫球蛋白樣凝集5抗體包裝1g

咪喹莫特（標準品） G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g

咪唑（標準品） Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g

咪唑煙(標準品) N-Acetyl-cysteine1號染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg

米(標準品) Zopiclone2號染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml

米奈鈣(標準品) Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g

(標準品) Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g

米諾地爾（硫鹽）敏樂啶(標準品) Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml

米屈肼(標準品) L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml

米替福新(標準品) RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g

擬青霉屬Paecilomyces│sp. 質量規(guī)格：>720IU/MG,BR膜DNA抗體試劑盒1-脫氧野尻霉;1-Deoxynoji

醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質量規(guī)格：效價測定角蛋白21-1片段試劑盒;Tacrolimus

肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質量規(guī)格：EP/USP角蛋白18-M65試劑盒10－脫乙?；投II;10-Dea
核酮糖1,5-二磷酸羧化酶提取試劑PDK1(phospho Y373 + Y376) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠化3肌依賴性蛋白激1IgG2-酰吡啶 Standard for GC ,≥99.5% (GC)

Phospho-PDK1 (Ser241) /FITC  熒光標記化3肌依賴性蛋白激1IgG1-己硫 96%

Pdk4/FITC  熒光標記酮脫氫激4IgG2,3-戊二酮 98%

Pdx1/FITC  熒光標記胰十二指腸同源異型盒因IgG2,4-二羥苯酮 99%

PEA3/FITC  熒光標記多瘤促活化因子IgG2,6-二羥苯酮 99%

PEA15/FITC  熒光標記星形膠質PEA15IgG三(3,6-二氧雜庚) 95%

Phospho-PEA15 (Ser4)/FITC  熒光標記化星形膠質PEA15IgG AR

Phospho-PEA15 (Ser116) /FITC  熒光標記化星形膠質PEA15IgG 99.99% metals basis

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。