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詳細介紹
產(chǎn)品分類：細胞染色
儲存條件：4℃,避光,12個月
用途：主要用于成年男子精子核組蛋白成熟度的染色，可評價男性生育功能。
注意事項：精子產(chǎn)生成熟過程中，與精核DNA結合的堿性蛋白發(fā)生組型轉(zhuǎn)換，富含賴氨酸殘基的組蛋白逐漸被富含精氨酸和胱氨酸殘基的精核蛋白所取代。酸性條件下，苯胺藍與賴氨酸殘基結合生成藍色或紫藍色化合物，從而指示富含賴氨酸殘基蛋白質(zhì)的存在，而核蛋白成熟的精子不被染色，如用伊紅復染則核蛋白成熟的精子為紅色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
精子核蛋白染色液 | 20T | FS-R6693 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
去氫土莫 DBD-ED [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(2-aminoethylamino)-2,1,3-benzoxadiazole] 鳥苷環(huán)化激活蛋白2抗體包裝100ml
去亞基小檗堿（標準品） AABD-SH (=4-Acetamido-7-mercapto-2,1,3-benzoxadiazole) 鳥苷環(huán)化激活蛋白3抗體包裝25g
去氧紫草(標準品) 9-(Bromomethyl)acridine 基合成抗體包裝5g
去乙酰車葉草酯（標準品） DBD-COCl [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-chloroformylmethyl-N-methylamino)-2,1,3-benzoxadiazole]高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體包裝1g
全蝎（標準品） NBD-COCl [=4-(N-Chloroformylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體包裝250mg
全葉青蘭（標準品） o-Phthalaldehyde 戊二酰脫氫抗體包裝5g
拳參（標準品） Dansyl HydrazineGTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5mg
染料木苷（標準品） DBD-H [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-hydrazino-2,1,3-benzoxadiazole] 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體包裝25g
染料木/金雀異黃(標準品） NBD-H (=4-Hydrazino-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Hydrazine) 廣泛控制基合成1樣蛋白1抗體包裝5g
人參（標準品） 1,3-Cyclohexanedioneβ1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移2抗體包裝250mg
人參二(標準品) ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]磷化G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝100g
人參莖葉（標準品） Ferroceneacetic AcidG蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白2抗體包裝25g
人參蘆頭（標準品） (Hydrazinocarbonyl)ferrocene間隙連接蛋白10抗體包裝500g
人參三(標準品) Dimethyl Sulfoxide間隙連結蛋白46/白內(nèi)障相關蛋白抗體包裝1g
人參皂苷CK(標準品) 1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene間隙連結蛋白50/白內(nèi)障相關蛋白抗體包裝25g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品尿微量白蛋白試劑盒羅漢果苷III;Mogroside II
棒形小克銀漢霉Cunninghamella│clavata 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP grade尿相關蛋白C試劑盒律草;Humulone
ATCC44166=DSM2191資源名稱: 米根霉 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品尿皮龍膽;2,5-Dihydroxyben
精子核蛋白染色液Podoplanin Protein 平足蛋白抗原規(guī)格： 0.5mg
Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “撲克蒙"蛋白又稱“波克曼"蛋白規(guī)格： 0.5mg
Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多囊腎蛋白1抗原規(guī)格： 0.5mg
Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊腎蛋白2規(guī)格： 0.5mg
phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 磷suan化蛋白激meiB抗原（絲氨suan磷suan化位點：473）規(guī)格： 0.5mg
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