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詳細介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321223 |
商品介紹：
測定意義蔗糖轉化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據(jù)最適 pH，將高等植物Ivr分為酸性轉化酶（AI）和中性轉化酶（NI）兩種類型。 NI主要存在于細胞質(zhì)中，負責分解細胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。測定原理NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性自備用品可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
丹皮原苷；牡丹原甙(標準品)英文名： Wilforlide A免疫球蛋白結合蛋白-1抗體包裝25g
丹葉大黃英文名： Forsythoside E胰島樣生長因子不穩(wěn)定亞基ALS抗體包裝5g
丹葉大黃-3'-O-葡萄糖苷英文名： Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine豬胰島單克抗體包裝1g
丹芝B(標準品）英文名： EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea ExtractKB抑制蛋白激α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體包裝5g
單白前苷B英文名： Deoxycholic acid抗重組人胰島抗體包裝5g
膽固(標準品)英文名： Calcein-AM 磷化肌聚磷鹽磷樣蛋白1抗體包裝25g
膽紅(標準品)英文名： Nicotinamide胰島受體抗體包裝5g
膽木（標準品）英文名： cucurbitacins胰島受體α抗體包裝1g
膽(標準品)英文名： 5-Hydroxytryptophan（5-HTP）胰島受體β抗體包裝5g
淡豆豉（標準品）英文名： 5-HydroxytryptophanKB抑制蛋白激α/β抗體包裝10mg
蛋黃磷脂酰英文名： Imazapyr acid白介12抗體包裝250mg
當歸（標準品）英文名： Imazapyr acid干擾誘導35蛋白抗體包裝100ml
當歸尾（標準品）英文名： Lithocholic Acid完整膜蛋白E25A抗體包裝1g
當歸酰基戈米辛H(標準品)英文名： Potassium Oxonate小腸型脂肪結合蛋白抗體包裝5g
當歸?；昝仔?/span>O英文名： Potassium Oxonate胰島降解抗體包裝1g
多刺鏈霉菌Streptomyces│echinatus 質(zhì)量規(guī)格：≥90.0%,BR漢黃芩苷;Wogonoside
脫氮卓貝爾氏菌Zobellella│denitrificans 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,二合物顆粒體蛋白試劑盒黃芩;Baicalein
猴頭菌Hericium│erinaceus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品顆粒溶試劑盒黃豆黃苷; Glycitin
中性轉化酶（NI）測試盒50管/24樣*松乳菇 1-(4-基)-3-甲基-5-吡唑啉酮環(huán)磷酸鳥苷Elisa
烏飯樹擬莖點霉 2,5-二溴己二酸二乙酯NADH還原Elisa
豇豆慢生根瘤 4-溴鄰苯二甲酸酐色C還原Elisa
阪崎腸桿 亞磷酸二甲酯布魯東氏酪激Elisa
淡黃曲霉 5-吡啶-2-羧酸銅鋅超氧化物歧化Elisa
黑曲霉 DL-2-甲基丁酸甲酯L-天冬氧化Elisa
裂孔平伏 2-特戊酰氨基-6-皮考啉交替氧化Elisa
菊苣假單胞 2-特戊?；拎っ摎銭lisa
釀酒酵母 1-萘基異酸酯V型ATPElisa
芽孢桿 5-氟-2-異亞基氨基氧苯脫氧核糖核酸Elisa
枯草芽孢桿 溴二酸二甲酯透明質(zhì)酸Elisa
釀酒酵母 鈉固氮Elisa
華根霉 3,5-二甲基-1-氫-吡咯-2-羧酸叔丁酯-4-羧酸乙酯條紋花葉病Elisa
黃傘（可訂購） 2-溴二苯并線條花葉病Elisa
畢赤酵母 3,4-二肼鹽酸鹽1.6二磷酸果糖酸Elisa
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