剛果紅染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)
剛果紅的原理:
剛果紅篩選主要是根據(jù)菌落降解纖維素可以形成降解圈,氯化鈉沖洗再烘干后可以讓降解圈看的更清楚更易觀察、它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅染色后，再Nacl用漂洗，Nacl可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大大小小的透明因。
剛果紅染色法的使用:
方法一 :先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行焰色反應(yīng)在長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋質(zhì)量濃度為1 mg/ml.的CR溶液，10~15 min后，倒去CR溶液，加入物質(zhì)的量濃度為I mol/的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCI溶液，此時(shí),產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會(huì)出現(xiàn)透明圈。
(加NaCI的原因:剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底物成為賽糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大小不--的透明圈， 大的透明圈分解纖維素的能力就強(qiáng))。
方法二: 在倒平板時(shí)就加入剛果紅配制質(zhì)量濃度為10 mg/ml的CR溶液，滅菌后,按照每200 ml。培養(yǎng)基加入1 ml。的比例加入CR溶液，混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長(zhǎng)出茵落后，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會(huì)出現(xiàn)明顯的透明圈。
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