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血清鐵測定試劑盒說明書
閱讀：2317 發(fā)布時間：2011-8-29
血清鐵測定試劑盒說明書 50T
一、原理：
在酸性溶液和還原劑的作用下，使運鐵蛋白中鐵與蛋白分離，使血清中的高鐵還原成亞鐵，后者與雙吡啶結(jié)合成粉紅色的絡(luò)合物，在一定范圍內(nèi)，鐵離子的多少與色澤成正比。
二、試劑的組成與配制：
1、100mg/L鐵標準貯備液：1ml 溶液一瓶，4℃保存3個月。
2mg/L鐵標準應(yīng)用液的配制：取鐵標準貯備液0.2ml加蒸餾水定溶至10ml, 4℃保存。
2、鐵顯色劑：2號甲粉劑一支，2號乙粉劑一支，二號丙液100ml×1瓶，4℃保存6個月。
用時將甲、乙二粉劑倒入丙液中，充分混勻，溶解，即為鐵顯色劑，4℃避光保存。
三、操作表:
| | 空白管O | 標準管S | 測定管U |
| 蒸餾水（ml） | 0.5 | | |
| 2mg/L鐵標準應(yīng)用液（ml） | | 0.5 | |
| 血清 （ml） | | | 0.5 |
| 鐵顯色劑（ml） | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
混勻后，沸水浴5分鐘，（空白及標準管可以不煮），冷卻后離心，3500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，取上清液1.0ml,0.5cm光徑，波長520nm,雙蒸水調(diào)零，測各管吸光度OD值。
四、計算與舉例：
四、計算與舉例：
1、 計算公式：
血清鐵（mg/L）=×標準濃度（2mg/L）
血清鐵（umol/L）=×標準濃度（35.81umol/L）
*標準管鐵含量為2000ug/L,鐵原子量為55.847，所以標準管鐵含量為35.81umol/L
2、舉例：
取血漿0.5ml按操作表進行血清（漿）鐵測定，在520nm處，0.5cm光徑，測定各管吸光度為：空白管0.000，標準管0.038，測定管0.037，則計算如下：
血清鐵（umol/L）=×標準液濃度=×35.81=34.87（umol/L）
五、注意點：
1、 玻璃器材需嚴格清洗，避免鐵的污染，建議用一次性塑料試管。
2、 若上清渾濁，可再用另一試管再次離心后比色。