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恒遠文獻:垂直振動對大鼠腰椎小關(guān)節(jié)退變及骨密度影響的實驗 研究
閱讀：278 發(fā)布時間：2020-4-2垂直振動對大鼠腰椎小關(guān)節(jié)退變及骨密度影響的實驗研究
劉博1 高天君2* 馬遠征2 王亮2 黎立2
1． 河北北方學院，河北 張家口 0750002． jie放軍第 309 醫(yī)院，北京 100091
中圖分類號: Ｒ681. 5 + 3 文獻標識碼: A 文章編號: 1006-7108( 2016) 10-1246-05
摘要: 目的 觀察大鼠腰椎小關(guān)節(jié)突在不同振動頻率下關(guān)節(jié)軟骨退變程度及腰痛相關(guān)因子的表達情況，同時探究振動對骨密度的影響。方法 收集對照組和振動組( 振動組接受 15 min/ d，頻率 5 ～ 60 Hz、振幅 3 mm 的垂直振動 12 w) 大鼠腰椎小關(guān)節(jié)軟骨，采用 HE 染色和 AB-PAS 染色，進行 Mankin 評分評價軟骨退變程度; 免疫組化染色觀察凋亡軟骨細胞、COX-2、PGE2、CII 在小關(guān)節(jié)突軟骨表達; 雙能 X 線吸收法測量振動前后股骨頸骨密度。結(jié)果 對照組、5 Hz 振動組、20 Hz 振動組、60 Hz 振動組小關(guān)節(jié) Mankin 評分依次增加，有顯著性差異( P ＜ 0. 05) ; 組間凋亡軟骨細胞、COX-2、PGE2 表達隨著振動頻率增加而顯著性增強( P ＜ 0. 05) ; 對照組與 5Hz 振動組 CII 表達差異不明顯( P ＞ 0. 05) ，其余各組間 CII 表達差異明顯( P ＜ 0. 05) ; 組間骨密度增加值無顯著性差異。結(jié)論 長時間垂直振動可導致軟骨退變，振動頻率越大，小關(guān)節(jié)退變越重; 振動與致痛因子表達具有相關(guān)性; 5 ～ 60 Hz、3 mm 振幅振動不能促進幼齡大鼠 BMD 增加。
關(guān)鍵詞: 振動; 腰椎小關(guān)節(jié); 免疫組化; 原位末端標記法腰痛是患者就診zui常見的癥狀之一，直升機駕駛員、汽車駕駛員等人群中發(fā)病率較高。腰痛zui常見的致病因素包括退行性骨關(guān)節(jié)炎( osteoarthritis，OA) 、椎間盤源性腰痛等［1］。其中 OA 的主要病理變化是關(guān)節(jié)軟骨退變，其致病因素較多，常見的有炎癥介質(zhì)、異常機械應力等。有研究［2］發(fā)現(xiàn)異常應力可影響腰椎小關(guān)節(jié)正常的軟骨組成，從而導致關(guān)節(jié)軟骨退變，且退變程度與應力施加時間呈正相關(guān)。在少有的研究中，垂直振動作為應力的一種特殊形式，其對腰椎小關(guān)節(jié)退變及骨密度影響被列入本研究。
1 材料和方法
1. 1 實驗動物6w 齡 Sprague-Dawley 雄性大鼠 40 只，SPF 級，體重( 210 ± 10) g( jie放軍軍事醫(yī)學學院動物中心提供) ，合格 證 號 為 SCXK-( 軍) 2012-0004。實 驗 經(jīng)309 醫(yī)院動物實驗倫理委員會許可后實施。
1. 2 腰椎小關(guān)節(jié)退變動物模
1. 2. 1 動物分組: 隨機抽簽分組: 對照組 10 只，編號為 A; 振動實驗組 30 只，分為 3 組，每組 10 只，編號為 B、C、D，各組放入相同環(huán)境中單籠飼養(yǎng)。
1. 2. 2 建立模型: ①A 組不做特殊處理。②將振動各組大鼠分批放入振動訓練臺的特制容器內(nèi)，大鼠呈直立位，分別對 B 組、C 組、D 組施加 5、20、60 Hz垂直振動，每組振動 15 min / d，振幅峰值為 3 mm，連續(xù) 12 w。在振動前后，用 5% 水合氯醛( 7 mL / kg) 經(jīng)腹腔麻醉大鼠，雙能 X 線吸收法測量股骨頸 BMD。
1. 2. 3 取材和處理: 耳緣靜脈空氣栓塞法處死各組大鼠，收集 L5-L6 腰椎小關(guān)節(jié)軟骨; 4% 多聚甲醛溶液固定 24 h。15% 乙二胺四乙酸脫鈣 7d。流水沖洗 24 h。梯度酒精脫水后二甲苯透明，石蠟包埋。六張為一組連續(xù)切片，層厚 4 ～ 5 μm，樹膠封固。試劑來源: 細胞凋亡檢測試劑盒由上海羅氏制藥公司提供; 兔抗大鼠環(huán)氧化酶 2 抗體、兔抗大鼠 CollagenII 抗體、DAB 顯色試劑盒、SABC 免疫組化試劑盒、AB-PAS 染液由武漢博士德生物工程有限公司提供，兔抗大鼠前列腺素 E2 抗體由上海恒遠生物科技公司提供，余試劑由jie放軍 309 醫(yī)院動物實驗室提供。
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