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透徹分析酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)
閱讀：924 發(fā)布時(shí)間：2014-9-9 您能夠掌控好簡(jiǎn)單而復(fù)雜的ELISA實(shí)驗(yàn)嗎？當(dāng)然，對(duì)實(shí)驗(yàn)的熟練度與了解度還是要靠長(zhǎng)時(shí)間積累經(jīng)驗(yàn)的。我公司技術(shù)部人員總結(jié)出ELISA實(shí)驗(yàn)心得，一起來(lái)看看吧！
上海恒遠(yuǎn)生物透徹分析酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)：
ELISA測(cè)定現(xiàn)通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測(cè)定模式，測(cè)定操作非常簡(jiǎn)單，一般涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、大鼠ELISA試劑盒洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報(bào)告及解釋等方面，其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。
盡管ELISA測(cè)定的操作步驟非常簡(jiǎn)單，但有可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素卻較多，分布在測(cè)定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測(cè)定中出現(xiàn)問題的可能原因，特對(duì)常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。
ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問題及可能的原因問題可能的原因(非試劑盒本身的原因)：
1. 弱陽(yáng)性質(zhì)控樣本檢測(cè)不出 溫育的時(shí)間或溫度不夠；顯色反應(yīng)時(shí)間太短；所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2. 測(cè)定的重復(fù)性差(相同樣本兩次測(cè)定結(jié)果不一致)這是典型的由測(cè)定操作引起的問題，包括加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；加樣過快，孔間發(fā)生污染。
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為什么重組蛋白作為我的ELISA的對(duì)照有差異？
首先要考慮的是重組蛋白的質(zhì)量會(huì)高出試劑盒的可測(cè)試范圍數(shù)倍，必須將重組蛋白稀釋多次才能得到試劑盒的測(cè)試范圍。一般來(lái)說(shuō)是從mg/毫升稀釋到pg/毫升，在這中間光是移液管的誤差就達(dá)到了可測(cè)量的水平。
其次要考慮的是R&D的免疫測(cè)試方法測(cè)量的蛋白水平是用一種抗體捕獲的、用第二種抗體測(cè)定的，這種測(cè)定是在試劑盒研發(fā)時(shí)與標(biāo)準(zhǔn)蛋白校正過的。這些經(jīng)過測(cè)定的早期標(biāo)準(zhǔn)蛋白成為基本校正物，后來(lái)的標(biāo)準(zhǔn)都同它校正。這樣不同生產(chǎn)批號(hào)的免疫測(cè)定試劑盒將是一致的。這些基本校正物蛋白質(zhì)量的測(cè)量方法也許與你的試劑管中蛋白質(zhì)量的測(cè)定方法有所不同。
酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)前的五項(xiàng)準(zhǔn)備：
1. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2. 準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3. 濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1:19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4. 濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1:4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5. 應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。
我司提供免費(fèi)檢測(cè)服務(wù)：使用上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒只收取試劑盒的費(fèi)用，其他輔助試劑全部免費(fèi)。我們將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度，雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期，保質(zhì)保量完成委托實(shí)驗(yàn)，并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和材料用特快專遞免費(fèi)寄送到您手中。歡迎您我司酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格。
1. 根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量。
2. 用洗板機(jī)洗板時(shí)，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙上輕輕拍干，還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
3. 應(yīng)保證ELISA酶標(biāo)板清潔，整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。