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Elisa檢測雙抗體夾心法原理介紹
閱讀：957 發(fā)布時間：2015-6-3| 提 供 商 | 上海恒遠生物科技有限公司 | 資料大小 | 22KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 957次 |
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雙抗體夾心法原理：固相載體上包被抗體，再加入待測抗原(可以是血清或者其它樣本)，洗板(洗掉非特異性吸附)，再加入酶標抗體，再洗板(洗掉非特異性吸附)，再加底物顯色。這里有幾點需要注意：①抗原是大分子抗原，具有2個以上的抗原表位；②包被抗體和酶標記的抗體都是針對抗原的特異性抗體，只不過它們分別針對的是不同抗原表位，經(jīng)常被稱作一抗和二抗；③酶是催化底物顯色的，起到一個信號放大作用。
操作步驟：
1.將特異性抗體與固相載體聯(lián)結，形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2.加受檢標本，保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合，形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。
3.加酶標抗體，保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4.加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測知標本中抗原的量。