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酶聯(lián)免疫實驗技術重點解析

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    五月初夏即將開始,上海恒遠生物新品來襲!我公司本期主推新品酶聯(lián)免疫試劑盒新貨已到。我公司技術專員針對試劑盒新品,總結出酶聯(lián)免疫實驗技術重點解析,歡迎下載。

    1.準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等;

    2.根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量;

    3.按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑;

    4.標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存。

    實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。

    標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復溶。

    一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做82倍系列稀釋從2000pg/ml 15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內提高靈敏度。

    為了優(yōu)化靈敏度,建議放置一個晚上孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。

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