測(cè)試盒名稱：大  腸  菌  群  測(cè)  試  盒（單料型） 
   
   測(cè)試盒采用的測(cè)定方法： GB/T4789.3-2008大腸菌群MPN計(jì)數(shù)法 
   測(cè)試盒的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：分前后兩排透明方管，每個(gè)方管里面有一個(gè)特別設(shè)計(jì)的產(chǎn)氣窗，前排三個(gè)方管，后排六個(gè)方管，均含單料LST培養(yǎng)基，大腸菌群發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)氣，產(chǎn)氣窗內(nèi)產(chǎn)生氣泡,；采用無菌包裝，供用戶一次性使用； 
   測(cè)試盒的特點(diǎn)：   
   （1） 對(duì)大腸菌群測(cè)定的方法是GB/T4789.3-2008中*法大腸菌群MPN計(jì)數(shù)法； 
   （2） 省去了繁雜的試劑配制、分裝、消毒以及大量的收尾工作，及大地提高了實(shí)驗(yàn)室的工作效率，符合現(xiàn)代檢驗(yàn)向快速、準(zhǔn)確方向發(fā)展的要求； 
    （3） 試劑盒占用空間小，僅占原來一個(gè)樣品的十分之一空間，減少玻璃器皿及培養(yǎng)箱的周轉(zhuǎn)； 
   檢測(cè)對(duì)象：食品、瓶裝或桶裝飲用（純凈）水 
   應(yīng)用范圍：疾病預(yù)防控制中心,食品生產(chǎn)廠家,技術(shù)*質(zhì)檢部門,商檢局,海關(guān)。 
大腸菌群測(cè)試盒（單料型）使用說明 
（GB/T4789.3-2008*法大腸菌群MPN計(jì)數(shù)） 
準(zhǔn)備測(cè)試盒 
●.排氣泡：將測(cè)試盒前后分別以大約45度角傾斜，必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)下，以排除產(chǎn)氣窗內(nèi)氣泡；并將樣品編號(hào)填寫在盒蓋上； 
● 開口：將測(cè)試盒平放在桌面上，左手揭開活動(dòng)盒蓋，右手持經(jīng)火焰消毒并冷卻了的開口器, 在測(cè)試盒每管中間位置連續(xù)穿刺開口； 
樣品的稀釋 
    1.固體或半固體樣品：稱取25g樣品，放入盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min～10000r/min均質(zhì)1 min～2min，或放入盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min～2min，制成1：10的樣品勻液。 
     2.液態(tài)樣品：用無菌吸管吸取25ml樣品，置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1：10的樣品勻液。 
     3. 樣品勻液的pH值應(yīng)在6.5～7.5之間，必要時(shí)分別用1mol/L氫氧化鈉（NaOH）或1mol/L鹽酸（HCl）調(diào)節(jié)。 
     4. 用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1：10樣品勻液1mL，沿管壁緩緩注入9mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌試管中（注意吸管或吸頭*不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1支1ml無菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成1：100的稀釋液。 
     5. 根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，按上述操作，依次制作10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次，換用1支1ml無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過程不得超過15min. 
初發(fā)酵試驗(yàn) 
固體樣品 
     1：10的勻液1mL三管、1：100的勻液1mL三管、1：1000的勻液1mL三管、采用單料型大腸菌群測(cè)試盒；；操作方法如下： 
前排三大管內(nèi)接種1：10的樣品勻液各1mL，后排共六管，其中三管接種1：100的樣品勻液各1mL，另外三管接種1：1000的樣品勻液各1mL，將接種好的測(cè)試盒放入托盤內(nèi)，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)48±2h后，產(chǎn)氣窗內(nèi)無氣泡者，為大腸菌群陰性，如產(chǎn)氣窗內(nèi)有氣泡者，則進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。 
據(jù)陽性管數(shù)查得大腸菌群zui可能數(shù)（MPN）檢索表的實(shí)際數(shù)值報(bào)告結(jié)果 
液體樣品（一般情況下有如下兩種接種方式）： 
    A、原液1mL三管、1：10的樣品勻液1mL三管、1：100的樣品勻液1mL三管；操作方法如下： 
前排三大管內(nèi)接種原液各1 mL，后排共六管，其中三管接種1：10樣品勻液各1mL，另外三管接種1：100的樣品勻液各1mL，將接種好的測(cè)試盒放入托盤內(nèi)，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)48±2h后，產(chǎn)氣窗內(nèi)無氣泡者，為大腸菌群陰性，如產(chǎn)氣窗內(nèi)有氣泡者，則進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。 
    據(jù)陽性管數(shù)查得大腸菌群zui可能數(shù)（MPN）檢索表的實(shí)際數(shù)值除以10報(bào)告結(jié)果； 
     B、1：10的樣品勻液1mL三管、1：100的樣品勻液1mL三管、1：1000的樣品勻液1mL三管；操作方法如下： 
前排三大管內(nèi)接種1：10的樣品勻液各1mL，后排共六管，其中三管接種1：100樣品勻液各1mL，另外三管接種1：1000的樣品勻液各1mL；將接種好的測(cè)試盒放入托盤內(nèi)，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)48±2h后，產(chǎn)氣窗內(nèi)無氣泡者，為大腸菌群陰性，如產(chǎn)氣窗內(nèi)有氣泡者，則進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。 
    據(jù)陽性管數(shù)查得大腸菌群zui可能數(shù)（MPN）檢索表的實(shí)際數(shù)值報(bào)告結(jié)果. 
復(fù)發(fā)酵試驗(yàn) 
     用接種針從所有48±2h 內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物兩針移種于煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯管中，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24±2h后，觀察產(chǎn)氣情況，產(chǎn)氣者計(jì)為大腸菌群陽性管；沒產(chǎn)氣者，繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)24±2h，產(chǎn)氣者計(jì)為大腸菌群陽性管；沒產(chǎn)氣者為陰性管； 
注意事項(xiàng)： 
●在培養(yǎng)箱內(nèi)拿出裝有測(cè)試盒的托盤以及觀察結(jié)果時(shí)，應(yīng)平拿平放，以免由于測(cè)試盒的傾向而將陽性管產(chǎn)氣窗內(nèi)氣泡排出，而影響結(jié)果. 
（附注：因食品衛(wèi)生評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)沒變動(dòng)，為使檢測(cè)結(jié)果在進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)能轉(zhuǎn)化為與之相對(duì)應(yīng)的數(shù)值，固體樣品只能采用雙料型測(cè)試盒；液體樣品可以采用雙料型測(cè)試盒；也可以采用單料型測(cè)試盒；此僅供參考，各單位根據(jù)具體情況，靈活掌握）

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