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堿性固綠染色液的使用步驟

閱讀:2530      發(fā)布時間:2021-8-31
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  不同的氨基酸帶有不同化學性質的側鏈基團,有的帶有堿性側鏈,有的帶有酸性側鏈,由此組成的蛋白質具有不同數(shù)目的堿性基團和酸性基團,這些基團會使蛋白質在不同的pH溶液中帶有不同的凈電荷,整個蛋白質分子帶正電荷多,即為堿性蛋白。堿性固綠染色液是利用堿性蛋白質與帶有負電荷的堿性染料固綠結合進行染色,細胞中含量最為豐富的堿性蛋白為組蛋白,主要存在于細胞核中,因此染色后細胞核大部分被染成綠色。

  使用步驟:

  1.取新鮮血液1滴滴于載玻片一端,推片,室溫晾干。

  2.涂片浸入70%乙醇中固定5min,室溫晾干。

  3.涂片浸入酸性分化液中,60℃水浴30min。

  4.流水充分水洗,濾紙吸去殘留水分。

  5.涂片浸入堿性固綠染色液染色15min。

  6.流水沖洗,室溫晾干。

  7.直接鏡檢或滴加1滴中性樹膠,加蓋蓋玻片進行封片觀察。

  堿性固綠染色液的注意事項:

  1、血液涂片或骨髓涂片應厚薄均勻,以免影響染色效果。

  2、血細胞涂片染色要求新鮮全血或EDTA抗凝血。

  3、酸性分化液孵育后,沖洗應*,否則會干擾固綠的染色。

  4、染色過深可用或酒精適當脫色,不復染。

  5、pH值對染色有一定影響,載玻片應清潔、無酸堿污染,以免影響染色效果。

  6、固定液應定期更換,以免固定不充分導致著色不佳。

  7、染色液應定期更換,以免影響染色效果。

  8、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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