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大鼠GRO/CINC-1檢測(cè)試劑盒

【預(yù)期用途】

此試劑盒可用于定量檢測(cè)大鼠血清、EDTA-血漿和細(xì)胞上清液中的GRO/CINC-1。重組和天然形式GRO/CINC-1均可檢測(cè)。本產(chǎn)品僅用于研究，不用于診斷。

【前言簡(jiǎn)介】

細(xì)胞因子誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞趨化劑-1（CINC-1）最初是從IL-1β刺激的大鼠腎上皮樣細(xì)胞（NRK-52E）條件下的培養(yǎng)基中純化的。渡邊富山醫(yī)學(xué)和制藥大學(xué)的研究小組在1989年確定了編碼大鼠CINC-1的氨基酸序列。CINC-1是趨化因子的α（CXC）亞家族中的一員。另外三種大鼠CXC趨化因子（CINC-2α，CINC-2β，CINC-3/MIP-2）已被鑒定出來(lái)。CINC-1的蛋白序列與CINC-2α、CINC-2β、CINC-3/MIP-2的蛋白序列同源性為63 - 67%。此外，GROα、GROβ和GROγ與CINC-1的一致性分別為68%、71%和69%。這已經(jīng)表明，CINCs是人類GROs的大鼠對(duì)應(yīng)物。

【檢測(cè)原理】

大鼠GRO/CINC-1檢測(cè)試劑盒基于固相夾心法原理，利用兩種高特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)。四甲基聯(lián)苯胺（TMB）作為一種顯色原，顯色強(qiáng)度與大鼠GRO/CINC-1的量成正比。

【試劑盒組分】

1）微孔板：            96孔，包被抗大鼠GRO/CINC-1兔IgG親和純化

2）標(biāo)記抗體：          30倍濃縮，1x0.4ml，HRP-抗大鼠GRO/CINC-1兔IgG Fab’親和純化

3）標(biāo)準(zhǔn)品：            2x0.5ml，重組大鼠GRO/CINC-1

4）EIA緩沖液：        1x30ml

5）標(biāo)記抗體溶液：      1x12ml

6）底物液：            1x15ml

7）終止液：            1x12ml

8）洗滌緩沖濃縮液：    1x50ml，40倍濃縮

【儲(chǔ)存】

試劑盒應(yīng)儲(chǔ)存于2-8℃中，其有效期在試劑盒上注明，不要使用過(guò)期試劑。

【試劑制備】

（1）洗滌緩沖液

使用前平衡至室溫，并輕輕混合均勻

50mL洗滌緩沖濃縮液+1950mL蒸餾水，混合均勻，得到洗滌緩沖液工作液，稀釋后的洗滌緩沖液在冰箱中可儲(chǔ)存2周

（2）標(biāo)記抗體

在一次性試管中用標(biāo)記抗體溶液30倍稀釋標(biāo)記抗體濃縮液，若使用1條微孔板（8孔），需要800μL標(biāo)記抗體，即30μL標(biāo)記抗體濃縮液+870μL標(biāo)記抗體溶液，混合均勻

僅在使用前進(jìn)行制備，標(biāo)記抗體濃縮液應(yīng)在4℃下密封儲(chǔ)存

（3）標(biāo)準(zhǔn)品

向標(biāo)準(zhǔn)品中加入0.5mL蒸餾水使其溶解，得到的標(biāo)準(zhǔn)品濃度為600pg/mL。

準(zhǔn)備8支試管并向每支試管中加入230μL EIA緩沖液

將230μL重建后的標(biāo)準(zhǔn)品加入試管1中，輕輕混勻；將230μL試管1中溶液加入試管2中，混合均勻。連續(xù)2倍稀釋制備7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度，范圍為300 - 4.69pg/mL，試管8濃度為0pg/mL，作為樣本空白