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速率散射比濁法檢測補體C3、C4

時間:2009/9/24閱讀:335
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速率散射比濁法檢測補體C3、C4

 

    補體(complementC)是由近20種不同血清蛋白組成的多分子系統(tǒng),約占血清球蛋白總量的10%。補體在血清中的含量相對穩(wěn)定,不因免疫應(yīng)答而增加,僅在某些病理情況下才會發(fā)生波動。補體系統(tǒng)的基本組成包括9種血清蛋白成分,按發(fā)現(xiàn)的先后順序而分別命名為C1-9。補體是一個復(fù)雜的反應(yīng)系統(tǒng),除了溶解細(xì)胞和協(xié)助殺菌作用外,還可促進炎癥反應(yīng),與其他生物活性系統(tǒng)有相互促進、相互制約的關(guān)系,這些關(guān)系的紊亂是導(dǎo)致許多疾病損傷的物質(zhì)基礎(chǔ)。C3是一種β球蛋白,是補體中含量zui多、作用zui重要的一個組分,是補體兩條主要激活途徑的中心環(huán)節(jié),有重要的生物活性作用,可在肝臟中產(chǎn)生。C4是由肝臟、巨噬細(xì)胞合成的,參與經(jīng)典激活途徑,是補體中含量僅低于C3的重要組分。常用檢測方法為速率透射比濁法、速率散射比濁法等。

    [檢測方法速率散射比濁法

    [方法學(xué)原理抗原(C3、C4與抗體C3、抗C4在液相中可快速反應(yīng),形成的免疫復(fù)合物顆粒具有特殊的光學(xué)特性,使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。速率是指單位時間內(nèi)抗原、抗體形成免疫復(fù)合物的速度。隨著時間的延長免疫復(fù)合物總量是逐漸增加的,而速率變化為慢+快一慢,其反應(yīng)速率zui快的某一時間稱為速率峰。當(dāng)反應(yīng)體系中的抗體量過剩時,速率峰的高低只與C3C4含量成正比,儀器將測得的速率峰值通過對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的C3、C4濃度。

    [標(biāo)本準(zhǔn)備空腹靜脈血2ml,不抗凝。

    [試劑免疫比濁儀配套C3C4試劑盒,內(nèi)含有稀釋液、緩沖液、抗血清等,按說明書配制。

    [儀器全自動特種蛋白分析儀。

    [檢測步驟]

    1.標(biāo)本處理,3 500rpm離心lOmin,分離血清。

    2.根據(jù)操作程序進行樣品測定:

    (1)輸入杯號;

    (2)選擇所測項目C3、C4

    (3)存盤;   

    (4)編程完畢后,將標(biāo)本放人標(biāo)本杯中,且放入標(biāo)本盤中相應(yīng)位置,將所做項目的試劑放人試劑盤中相應(yīng)位置,確認(rèn)無誤后,開始運行特種蛋白分析儀。

    [正常參考值]  C308155gL5C4012036gL。   

    [注意事項]

    1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)置室溫環(huán)境中平衡。   

    2.試劑瓶蓋打開時應(yīng)注意打破瓶口的液膜,以防液感儀感應(yīng)錯誤。

    3.血清中若含有脂類應(yīng)高速離心分離脂質(zhì),防止假濁度產(chǎn)生。

    [臨床意義在感染性疾病中,急性感染期可見C3、C4增高。由于補體在肝細(xì)胞中合成,所以重癥病毒性肝炎、慢性病毒性肝炎,特別是轉(zhuǎn)化為肝硬化后,C3、C4水平均下降。

 

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