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藥典新風(fēng)向 | 生物學(xué)ELISA方法助力黃曲霉毒素檢測(cè)

時(shí)間:2021-8-7 閱讀:960
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新版 2020 藥典擴(kuò)大了成熟檢測(cè)技術(shù)在藥品質(zhì)量控制中的推廣和應(yīng)用,如新增聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法、DNA測(cè)序技術(shù)指導(dǎo)原則等,推進(jìn)分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)在中藥飲片、動(dòng)物組織來(lái)源材料、生物制品起始材料、微生物污染溯源鑒定中的應(yīng)用。可見生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)在越來(lái)越多的領(lǐng)域都將大有可為,未來(lái)可期。

——部分文案節(jié)選自《中國(guó)藥典2020年版》


某些中藥在種植、儲(chǔ)存等過(guò)程中易產(chǎn)生一些真菌毒素,如黃曲霉毒素等,對(duì)人體具有毒性,有必要加強(qiáng)相關(guān)真菌毒素的控制。中藥品種的原材料大多源于自然環(huán)境下生長(zhǎng)的植物、動(dòng)物或礦物,其存在有害殘留物質(zhì)或污染物質(zhì)的概率較髙。而黃曲霉毒素是由真菌黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一類代謝產(chǎn)物,廣泛存在于自然界中。

由于各類真菌毒素的發(fā)生毒性的機(jī)理不同,容易受污染的對(duì)象也有所不同。因此,應(yīng)選取容易受污染的中藥品種進(jìn)行相應(yīng)毒素檢測(cè)方法的開發(fā)。糧稃類、種子類、油性成分多的品種應(yīng)注意黃曲霉毒素的檢測(cè);處方中含有易污染的藥材以及生粉投料的中成藥品種應(yīng)注意相關(guān)真菌毒素的檢測(cè)。

2015 版藥典推薦的黃曲霉毒素檢測(cè)方法是高效液相色譜或高效液相色譜-質(zhì)譜(HPLC MS)聯(lián)用,2020 版藥典新增了酶聯(lián)免疫法(ELISA)的生物學(xué)檢測(cè)方法。相較于傳統(tǒng)的高效液相色譜或高效液相色譜-質(zhì)譜(HPLC MS)聯(lián)用方法,酶聯(lián)免疫法(ELISA)在儀器成本、檢測(cè)成本、檢測(cè)時(shí)間及樣品前處理上都具有相當(dāng)大的優(yōu)勢(shì),普通檢測(cè)人員可操作性高,且 ELISA 具有跟傳統(tǒng)方法相當(dāng)?shù)臋z測(cè)靈敏度。


IKA推薦
ELISA 檢測(cè)黃曲霉毒素的實(shí)驗(yàn)步驟


01
供試品粉末2g(50mL離心管)
加20ml甲醇,振蕩5min

 

Tube Mill control 
試管研磨機(jī)
IKA PETTE 
移液器
KS 260 basic / control
圓周振蕩搖床

02
渦動(dòng)30s后
加san氯甲烷再次振蕩2min

 

VXR BASIC
小型振蕩器

03
微孔板抗體包被
加酶標(biāo)抗原混勻、孵育(25°C  45min)
或底物顯色反應(yīng)(25°C 15min)

 

MTS 2/4 DIGITAL 
酶標(biāo)板震蕩器
Matrix Orbital Delta Plus 
高低溫混勻器


*備注:搖床/高低溫混勻器需根據(jù)反應(yīng)容器規(guī)格選配夾具



關(guān)于IKA 


 

IKA是工業(yè)和科研領(lǐng)域先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備, 分析儀器設(shè)備和加工技術(shù)制造商之一。總部位于德國(guó)施陶芬, IKA的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)超過(guò)160個(gè)國(guó)家的客戶。公司擁有超過(guò)900多名員工, 致力于為客戶提供完善的技術(shù), 幫助客戶獲得成功。同時(shí),IKA還與*大學(xué)和科學(xué)家進(jìn)行著密切的合作, 支持其在科研道路上不斷探索。除了位于德國(guó)的總公司, IKA現(xiàn)在在美國(guó), 中國(guó), 馬來(lái)西亞, 日本, 印度, 巴西, 韓國(guó), 越南, 英國(guó)和波蘭均設(shè)有獨(dú)立運(yùn)營(yíng)的全資子公司。



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